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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有关于菌种~~疑惑
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bettyshan

木虫 (正式写手)

梦幻biobrick

[交流] 【求助/交流】有关于菌种~~疑惑 已有4人参与

我的野生菌最近产生抗性了，让人很是郁闷。
以下几种情况让我不理解：
1、我挑单菌落于无菌水中，分别接种于加抗生素的LB及无抗生素的LB，正常。菌体在有抗生素的液体中不长。我将上述LB培养物接100ul 涂布于加抗生素LB平板，却有菌落生成，约有5个左右。说明LB培养物中有抗性菌。
让我疑惑的是，为什么之前同样在液体培养基中的培养物没有任何生长呢？培养两天都未见一点混浊。
2、我将初步验证的无抗性的单菌划线，挑单菌落对应点板于含抗生素和不含抗生素的LB平板，培养24小时后，挑无抗生的菌。再划线，再挑单菌落对应点板。按理讲，以之前无抗性的单菌落划线得来的第二批单菌落均不应该有抗 性，可是我在第二次筛选点板的时候，仍有个别菌落有抗性……

我对这个都做了好多次了，但是还是达不到我筛选无抗性菌落的目的，很是郁闷。因为有菌种的原因导致下面的实验都进行不下去了。
不知道哪位高手帮我分析一下原因，同时传授一下还有什么好的筛选方法呢？

不胜感激了~~~
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我们都是芸芸众生的小人物，相遇相知，都是幸福！
1楼 2010-10-19 18:08:32
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-19 21:42:45
1   你的抗生素的平板  抗生素失效了？

综合考虑会不会是你的抗生素时间长而部分失效。达不到抑菌的作用？

或者。。。。确实菌株突变了。。。。。。。。这个太罕见。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-10-19 19:49:41
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天龙n部

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你培养24小时，抗性都失效了，我们实验室氨苄最多培养16小时
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-10-19 23:00:31
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ladtalent

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是卫星DNA的关系 你试试换一种抗生素或者加大抗生素浓度 可能就好了
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-10-20 08:29:05
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bettyshan

木虫 (正式写手)

梦幻biobrick
引用回帖:
Originally posted by yixuanwin at 2010-10-19 19:49:41:
1   你的抗生素的平板  抗生素失效了？

综合考虑会不会是你的抗生素时间长而部分失效。达不到抑菌的作用？

或者。。。。确实菌株突变了。。。。。。。。这个太罕见。

我也觉得菌株突变有些罕见，总不至于抗性变成有抗性……
谢谢啦~
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我们都是芸芸众生的小人物，相遇相知，都是幸福！
5楼2010-10-20 09:08:35
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bettyshan

木虫 (正式写手)

梦幻biobrick
引用回帖:
Originally posted by ladtalent at 2010-10-20 08:29:05:
是不是卫星DNA的关系 你试试换一种抗生素或者加大抗生素浓度 可能就好了

谢谢~~
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我们都是芸芸众生的小人物，相遇相知，都是幸福！
6楼2010-10-20 09:08:55
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