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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】最近实验室的怪事
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plantst5928

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】最近实验室的怪事 已有12人参与

最近我们实验室发生了一件很怪的事，几乎所有的菌都摇不起来，转化后可以看到斑，挑斑后验证的阳性，接到大瓶里摇，就摇不起来，刚开始还能看到有菌，稍微浑浊，过一会培养基就开始变得澄清，菌体开始沉淀，变成絮状，之后摇过夜又慢慢的变成浑浊，但是提的质粒非常的弱，菌液加完溶液2后非常的浑浊，始终不澄清，溶液3离心后，白色沉淀的样子也不对，感觉像粉末。现在已经发现top10和BL21都是这样的。大家有没有遇到过这种情况？ 菌种？噬菌体？还是培养基的问题？那位能帮忙分析一下怎么回事，我代表实验室谢谢大家!!
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1楼 2010-04-12 18:58:53
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qdeev

金虫 (正式写手)
★ ★
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1949stone(金币+1): 2010-04-12 21:00
噬菌体是不可能了。。。是噬菌体的话就直接澄清了。。没有后面的菌体沉淀什么的了。。
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2楼2010-04-12 20:01:33
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weiyanbme

木虫 (正式写手)
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amisking(金币+2): 2010-04-12 20:41
1949stone(金币+2): 2010-04-12 21:00
引用回帖:
Originally posted by plantst5928 at 2010-04-12 18:58:53:
最近我们实验室发生了一件很怪的事，几乎所有的菌都摇不起来，转化后可以看到斑，挑斑后验证的阳性，接到大瓶里摇，就摇不起来，刚开始还能看到有菌，稍微浑浊，过一会培养基就开始变得澄清，菌体开始沉淀，变成絮 ...

会不会是你的菌种出问题了，我们实验室就是由于保存的不规范就出现过类似的问题，以前4h就摇起来的现在6-7个小时都摇不起来，联系了NEB公司的，要了新的菌种就好些了
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3楼2010-04-12 20:07:03
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plantst5928

铜虫 (小有名气)
本人认为不是菌种的问题，因为实验室的人用的菌种来源不一，有的是从不同公司买的感受态转的，有的是买的菌种，自己制的感受态转的，都出现了这些问题。所以基本上不会是菌种的问题，难道是这一批的培养基出问题？还有其他的原因吗？
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4楼2010-04-12 22:19:33
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tingl0087

金虫 (小有名气)
★
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哦，好诡异哦，是不是染菌了？染了真菌什么的，摇床定期要用甲醛熏蒸灭下菌的
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5楼2010-04-12 22:56:26
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weiyanbme

木虫 (正式写手)
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lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-06-25 23:01:34
引用回帖:
Originally posted by plantst5928 at 2010-04-12 22:19:33:
本人认为不是菌种的问题，因为实验室的人用的菌种来源不一，有的是从不同公司买的感受态转的，有的是买的菌种，自己制的感受态转的，都出现了这些问题。所以基本上不会是菌种的问题，难道是这一批的培养基出问题？ ...

在保存菌种的时候很容易出问题的，放置时间长的菌最好要重新摇下保存，我们发现菌保存久了貌似活性等会发生变化（我们是在灭菌的甘油里，-70度保存的），就是与噬菌体结合后蓝斑变的很模糊，新的菌就清晰一下，所以不要以为保存的就不会出问题；其实冻存的细胞也是最好隔一段时间再重新复苏保存时一样的道理。
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6楼2010-04-12 23:20:07
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江流儿

木虫 (正式写手)
★
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用不同的抗生素都出现这种情况吗？是不是有的抗生素公司给包装错了呢？
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7楼2010-04-13 08:59:06
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Rubisco580

金虫 (小有名气)
配制培养基的试剂会不会有问题？
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8楼2010-04-13 10:36:40
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xyls6868

新虫 (小有名气)
摇床感温系统出问题没
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9楼2010-06-05 22:44:39
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muchongchong838

禁虫 (正式写手)
★
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10楼2010-06-06 16:21:56
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