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695

木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】pfu直接用于TA克隆? 已有3人参与

前段时间,用promega 的pfu直接进行了TA克隆,PCR中并没有加加普通的taq,也没有进行后续的加尾A,直接连接到了pGEMT EASY VECTOR,得到的阳性克隆进行了测序,结果和我的5RACE和3RACE拼接结果都一致,只有1-2个碱基不一致,请问这样的结果可靠吗?就是看大家都说pfu不能直接用于TA克隆。请高手指点

[ Last edited by 695 on 2010-4-23 at 23:29 ]
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):值得推敲 2010-04-24 00:40
奇怪,难道这样做也可以,不用加A也能连上?否则就是你的载体有平末端?
会当凌绝顶,一览众山小
2楼2010-04-24 00:03:11
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695

木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by sutao1979 at 2010-04-24 00:03:11:
奇怪,难道这样做也可以,不用加A也能连上?否则就是你的载体有平末端?

恩,是啊,也是奇怪,pGEM T easy 没这个功效吧 载体上的通用引物和特异引物,以及不同组合的酶切都验证了
3楼2010-04-24 02:05:59
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yangtao16

禁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

4楼2014-07-19 13:06:22
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