| 查看: 2709 | 回复: 18 | ||
[求助]
双酶切连接不成功 已有3人参与
|
||
|
用赛默飞快切酶Nde1和Sma1双酶切，Nde1和Bamh1双酶切，37℃酶切2小时，连接始终不成功，测序不是没信号就是载体自连。载体确定没问题，酶也没问题。做了3次了，什么问题呢？就差这两个载体实验就做完了，求帮助！！ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有246人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有6人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 双酶切很近的酶切位点，总是切不成功，如何解决？
已经有19人回复
- 双酶切鉴定，为什么找不到所需要的目的条带？
已经有8人回复
- 求助！！！双酶切连接不上这是为什么
已经有27人回复
- 用takara的NdeI和KpnI双酶切连接问题，一直连接不成功，求帮忙？
已经有8人回复
- 双酶切 连接转化问题
已经有3人回复
- 酶切 连接
已经有2人回复
- Sac1和Xho1的双酶切连接
已经有5人回复
- 酶切连接 （难题一个接一个呀）
已经有17人回复
- 求助-Sac1和Spe1的双酶切连接
已经有13人回复
- 急求酶切，回收及连接详细操作步骤
已经有10人回复
- 很奇怪的酶切连接问题
已经有13人回复
- 纠结的分子实验，双酶切连不上，求助
已经有14人回复
- 酶切、连接和转化
已经有9人回复
- 双酶切后液体回收
已经有3人回复
- 连接检测时双酶切总是切不开
已经有9人回复
- 连接产物酶切的一点问题
已经有12人回复
- 请大家帮忙分析一张酶切图，双酶切片段有点诡异
已经有2人回复
- 双酶切，切不下来
已经有19人回复
- （侯氏出品）双酶切连接反应之全攻略
已经有89人回复
- 双酶切，连接，转化问题
已经有30人回复
- 【原创】酶切连接转化个人经验，希望对大家有帮助
已经有67人回复
- 【求助/交流】双酶切回收柱未晾干，对连接影响大么
已经有19人回复
9楼2017-05-19 22:45:42
guoguo_fei
新虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 466.5
- 散金: 40
- 帖子: 124
- 在线: 26.5小时
- 虫号: 2335571
- 注册: 2013-03-10
- 专业: 药物分析
7楼2017-05-19 11:36:18
fjtony163
版主 (文坛精英)
米米
- 应助: 361 (硕士)
- 贵宾: 6.876
- 金币: 70610.6
- 散金: 36050
- 红花: 222
- 沙发: 616
- 帖子: 21912
- 在线: 3793.7小时
- 虫号: 1397876
- 注册: 2011-09-11
- 专业: 遗传学研究新技术与方法
- 管辖: 论文翻译
2楼2017-05-19 03:36:02
stabilized
银虫 (小有名气)
- 应助: 62 (初中生)
- 金币: 374.8
- 红花: 10
- 帖子: 233
- 在线: 39.4小时
- 虫号: 4419850
- 注册: 2016-02-20
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
3楼2017-05-19 08:56:11
胡奎0925
木虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2100.2
- 散金: 32
- 红花: 1
- 帖子: 237
- 在线: 60.5小时
- 虫号: 1754136
- 注册: 2012-04-13
- 专业: 农业昆虫学
4楼2017-05-19 08:58:42
原来，是这样
金虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1087.4
- 散金: 1685
- 红花: 9
- 帖子: 282
- 在线: 483.5小时
- 虫号: 3599778
- 注册: 2014-12-17
- 性别: GG
- 专业: 抗肿瘤药物药理
5楼2017-05-19 09:47:51
沉默、颜泪
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3924.8
- 散金: 110
- 红花: 7
- 帖子: 493
- 在线: 104.7小时
- 虫号: 4117547
- 注册: 2015-10-03
- 专业: 白血病
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-22 20:08:19
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-22 20:08:19
|
个人建议做TA克隆，然后再酶切目的基因。我试过NdeI 这个内切酶，不是一般的难，7个保护碱基切20小时效率才75%左右。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2017-05-19 10:19:35
13349308281
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 421.6
- 散金: 25
- 红花: 1
- 帖子: 112
- 在线: 33.4小时
- 虫号: 3786461
- 注册: 2015-04-03
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
8楼2017-05-19 16:29:07
沉默、颜泪
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3924.8
- 散金: 110
- 红花: 7
- 帖子: 493
- 在线: 104.7小时
- 虫号: 4117547
- 注册: 2015-10-03
- 专业: 白血病
11楼2017-05-21 11:44:54
18楼2017-05-25 12:21:55
|
层主，我现在也在做这个双酶切，有木有好办法确定双切成功，我现在是载体两个酶分开切，而且都是同时用两个酶单酶切，结果是，这俩酶都好使，但是目的基因就没法看是不是酶切成功了，转化后菌长了特别多。怎么改进一下 发自小木虫Android客户端 |
10楼2017-05-21 10:21:34
