| 查看: 994 | 回复: 2 | ||
Marado金虫 (正式写手)
Dreamer
|
[求助]
请大家帮忙分析一张酶切图，双酶切片段有点诡异
|
|
所切质粒为pMD19-T（2692bp）连接有目的片段（1926bp），连接成功后总质粒大小为4618bp，酶切位点为：Not I与BamH I 如图所示： 单酶切验证质粒应该是连上了目的片段，但是Not I酶切效率极其低下，双酶切因此也好不到哪去，我用的Not I单酶切体系来自于说明书如下： 质粒：2ul Not I：1ul 10*H buffer：2ul 0.1%BSA：2ul 0.1%Tritonx-100：2ul 水：11ul 总计：20ul体系，过夜酶切，37℃ 从图中看出双酶切片段很多很杂，尤其是1000bp及以下的两条片段无法判断是什么，我目的片段中并不包含BamH I和Not I这两个酶切位点，难道我P出来的不是目的片段，而是非特异性条带   |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有137人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 双酶切，切不下来
已经有19人回复
- 大家帮我看看啊，我做的酶切反应到底是怎么回事呢？急急急！
已经有15人回复
- 求助：重组质粒酶切问题！请大家帮我解决一下，急！
已经有7人回复
- 双酶切看不到小片段，为什么？
已经有19人回复
- 做限制性酶切，请帮忙分析下
已经有10人回复
- 将质粒上紧挨着的两个酶切位点进行双酶切后连接外源基因片段，是不是不好连接？
已经有13人回复
- 双酶切的片段不见了？
已经有6人回复
- 酶基因表达量高，酶活性就一定高吗？（请大家帮帮忙，谢谢）
已经有12人回复
- 【求助/交流】双酶切大问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】帮我看一下质粒单双酶切图！
已经有29人回复
tianyinghu
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 23 (小学生)
- 金币: 527.5
- 红花: 1
- 帖子: 52
- 在线: 43.9小时
- 虫号: 502164
- 注册: 2008-02-14
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2012-07-04 12:13:54
Marado
金虫 (正式写手)
Dreamer
- MolEPI: 2
- 应助: 81 (初中生)
- 金币: 1458.8
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 430
- 在线: 196.7小时
- 虫号: 1512351
- 注册: 2011-11-27
- 专业: 生物化学
3楼2012-07-04 12:29:21