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燕子sy

银虫 (小有名气)

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[求助] 求助，蛋白电泳跑胶的问题已有4人参与

本人近期在跑胶（sds-page），以前从没做过，那胶跑得实在是不忍直视啊，大神们帮忙看看都有些什么问题，如何改进，我知道有很多问题，求吐槽，谢谢！
实验结果见下图，很明显的几个问题，一、空白的那组条带，整条都很蓝，都看不清条带了；二、加样组有很多竖着的条带；三、想让条带再往下跑跑。

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我比小强还小强，越挫越勇！

1楼 2017-01-18 10:10:26

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十四_14

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引用回帖:

9楼: Originally posted by 燕子sy at 2017-01-18 16:28:40
我的running buffer配方：3.03g的tris，14.4g的甘氨酸，1g的SDS溶于1000mL的去离子水中。
我的空白组是结肠癌rko细胞的总蛋白。
我的实验目的是寻找某个小分子药物的靶点，实验方法是加药培养，提取总蛋白，加酶 ...

running buffer 的配方跟我们的一样  应该没有问题
那你先从制胶的问题开始解决  配胶溶液的时候一定要混匀  并且要凝固充分  可以放在37℃凝胶40min-1小时  装电泳板的时候保证板底没有气泡

你可以找一个已知分子量的标准蛋白一起跑一下  或者是别人的蛋白电泳样品  能够跑出正常条带的就行  一起对比一下