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1楼2015-08-27 21:04:00

gcg98

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等电聚焦升压最高到多少？

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fe123333

2楼2015-08-30 06:00:23

gcg98

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第一项上样没有完全溶解

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3楼2015-08-30 06:02:06

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引用回帖:

2楼: Originally posted by gcg98 at 2015-08-30 06:00:23
等电聚焦升压最高到多少？

聚焦升压最高到了10000v。您是说上样时还有部分蛋白没有溶解，以固体形式存在于裂解液中？

4楼2015-09-01 09:27:53

fe123333

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引用回帖:

3楼: Originally posted by gcg98 at 2015-08-30 06:02:06
第一项上样没有完全溶解

上样前我测了样品的电导，发现盐浓度不是很高，应该不是盐的问题

5楼2015-09-01 09:54:01

gcg98

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引用回帖:

4楼: Originally posted by fe123333 at 2015-09-01 09:27:53
聚焦升压最高到了10000v。您是说上样时还有部分蛋白没有溶解，以固体形式存在于裂解液中？...

是的，上样液一定要清澈，表示已经完全溶解

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6楼2015-09-01 11:03:42

fe123333

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6楼: Originally posted by gcg98 at 2015-09-01 11:03:42
是的，上样液一定要清澈，表示已经完全溶解
...

我把之前上样的蛋白又离心了一下，未发现有沉淀存在，这说明蛋白可以完全溶解吧。请问还有什么原因可能造成横条纹呢？是蛋白样品不好还是聚焦程序有问题？另外横条纹现象与染色方法有关吗？

7楼2015-09-01 17:44:57

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7楼: Originally posted by fe123333 at 2015-09-01 17:44:57
我把之前上样的蛋白又离心了一下，未发现有沉淀存在，这说明蛋白可以完全溶解吧。请问还有什么原因可能造成横条纹呢？是蛋白样品不好还是聚焦程序有问题？另外横条纹现象与染色方法有关吗？...

聚焦不好会导致横条纹，另外，变性不完全也会导致横条纹，建议选择好聚焦结束时间，并加大变性力度，另外，除脂要除净

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8楼2015-09-01 20:01:44