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求助:蛋白电泳时间
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小企e
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求助:蛋白电泳时间
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我跑蛋白电泳,使用的是恒流30mA,要跑五到八个小时。marker总是缺少最顶端的两个条带,不知道为什么?所有的试剂都是重新配的,已经做了两周了,好痛苦!求电泳大神指教!
使用的分离胶12.5%,浓缩胶5%!
我急需顶端的条带
DSC_1321.JPG
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2014-04-27 15:51:41
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这么长时间好多带都跑出去了,你确定中间的不是最上面的带?
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2014-04-28 09:56:23
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直接200V电压,最多一个小时搞定。。。
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8楼
2014-04-28 11:26:03
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请大神们不吝赐教
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还真没遇见过这种情况,以前只有底端MarK跑不出来的,还没有顶上mark跑不出来的。另外建议换10孔的梳齿,你的梳孔太小好像也比较影响跑胶。
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3楼
2014-04-27 21:04:17
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导师有没有说最大电流能到多少?貌似还可以增加点
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼
2014-04-28 01:32:08
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heylixing
at 2014-04-27 21:04:17
还真没遇见过这种情况,以前只有底端MarK跑不出来的,还没有顶上mark跑不出来的。另外建议换10孔的梳齿,你的梳孔太小好像也比较影响跑胶。
是吗,我用20齿的也是这种状况。。。。。这个是26齿的。。。。而且我没有10齿的啊。
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5楼
2014-04-28 09:24:24
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heylixing
at 2014-04-27 21:04:17
还真没遇见过这种情况,以前只有底端MarK跑不出来的,还没有顶上mark跑不出来的。另外建议换10孔的梳齿,你的梳孔太小好像也比较影响跑胶。
你跑蛋白一般都跑几个小时啊?
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6楼
2014-04-28 09:25:26
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jurkat.1640
at 2014-04-28 09:56:23
这么长时间好多带都跑出去了,你确定中间的不是最上面的带?
不是。颜色最深的带分子量大概40多kDa,marker的从下到上第四条带也是40多。我做了很多,以前跑了十几个小时小带貌似也没跑下去呀。我一直怀疑的是大分子量的带还没跑下来,但又觉得不可能
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9楼
2014-04-28 13:25:32
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lpzl
at 2014-04-28 11:26:03
直接200V电压,最多一个小时搞定。。。
真的那?我看试验书上都说是恒流,我就没敢试恒压。我跑的是芸豆蛋白,提的粉末。不过外国期刊上貌似都是恒压。。。。。
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10楼
2014-04-28 13:27:16
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