24小时热门版块排行榜    

查看: 7375  |  回复: 20
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

燕子sy

银虫 (小有名气)

[求助] 求助,蛋白电泳跑胶的问题 已有4人参与

本人近期在跑胶(sds-page),以前从没做过,那胶跑得实在是不忍直视啊,大神们帮忙看看都有些什么问题,如何改进,我知道有很多问题,求吐槽,谢谢!
实验结果见下图,很明显的几个问题,一、空白的那组条带,整条都很蓝,都看不清条带了;二、加样组有很多竖着的条带;三、想让条带再往下跑跑。

求助,蛋白电泳跑胶的问题
0118-2.PNG


求助,蛋白电泳跑胶的问题-1
0118-3.PNG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

我比小强还小强,越挫越勇!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

燕子sy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 十四_14 at 2017-01-18 15:15:32
如果是买的试剂  那应该按照说明书来就行
running buffer你的配方是什么?

另外  虽然你marker跑得不好  但是也可以看出条带  所以你的样品应该也有一点问题  
你的空白组  就是不加酶的那个  是什么样品?? ...

我的running buffer配方:3.03g的tris,14.4g的甘氨酸,1g的SDS溶于1000mL的去离子水中。
我的空白组是结肠癌rko细胞的总蛋白。
我的实验目的是寻找某个小分子药物的靶点,实验方法是加药培养,提取总蛋白,加酶水解,跑胶寻找差异条带,然后就跑成了上面那样裂解液是碧云天买的,蛋白酶是sigma的。
我感觉制胶肯定是有问题的,然后我的样品和loading buffer好像也有问题,但我不知道问题在哪儿!
我比小强还小强,越挫越勇!
9楼2017-01-18 16:28:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
燕子sy(youlinglyw代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2017-01-22 18:31:31
说明你的蛋白酶效果很好,蛋白质都基本被降解了
2楼2017-01-18 10:22:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

燕子sy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-01-18 10:22:28
说明你的蛋白酶效果很好,蛋白质都基本被降解了

哈哈,效果是毋庸置疑的,就是为加酶组有很多乱七八糟也看不明的条带,还有我那空白对照为什么那样,底色那么蓝?您知道吗?
我比小强还小强,越挫越勇!
3楼2017-01-18 10:56:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 燕子sy at 2017-01-18 10:56:39
哈哈,效果是毋庸置疑的,就是为加酶组有很多乱七八糟也看不明的条带,还有我那空白对照为什么那样,底色那么蓝?您知道吗?...

蓝色是蛋白
4楼2017-01-18 11:25:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +6 gjjjzhong 2026-08-18 7/350 2026-08-18 12:48 by laoda193707
[硕博家园] 读博的好处 +5 lnee 2026-08-11 5/250 2026-08-18 12:32 by 学员tGYWa5
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +44 医学老男孩 2026-08-13 98/4900 2026-08-18 12:14 by wenky
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 8/400 2026-08-18 11:47 by gltch
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 5/250 2026-08-18 11:25 by 無關想念
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +5 基诺咪客 2026-08-17 6/300 2026-08-18 11:06 by hunter无悔
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
信息提示
请填处理意见