应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 蛋白电泳，求助
101/1返回列表
查看: 1763  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

rendan911117

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白电泳，求助 已有4人参与

蛋白marker用的是生工的BM201，说明书上有9条带，我一直只有4-5条带。15%的分离胶，90+130V。一个半小时左右。
因为没办法确定marker出现的五条带对应的分子量是多少，所以没办法继续实验。图片是我跑的蛋白胶，中间的五条带的是marker。
跑过蛋白电泳的同学请帮我看看是哪里出了问题？谢谢大家！

蛋白电泳，求助
IMG_1477__1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-07-31 16:04:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这几条Marker应该是大的那几条。你这胶浓度确实是15%吗？觉得不太像啊
赞一下 回复此楼
2楼2015-07-31 16:44:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rendan911117

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by a86052 at 2015-07-31 16:44:03
这几条Marker应该是大的那几条。你这胶浓度确实是15%吗？觉得不太像啊

我的配方是 低缓2.5ml 30%丙烯酰胺 5ml  水 2.5ml  过硫酸铵 50ul  TEMED 10ul     我想问一下 怎么才能看出这个胶不像是15%的胶  我是新接触这个实验  都不太懂
赞一下 回复此楼
3楼2015-07-31 18:35:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang001zh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没拍全不能完全确定，你看看分离胶上层有没有蛋白没有跑下来 没有的话就按maker分子量从大到小对应就行

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-07-31 18:36:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a86052

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by rendan911117 at 2015-07-31 18:35:58
我的配方是 低缓2.5ml 30%丙烯酰胺 5ml  水 2.5ml  过硫酸铵 50ul  TEMED 10ul     我想问一下 怎么才能看出这个胶不像是15%的胶  我是新接触这个实验  都不太懂...

如果15的胶，按照你的电压和电泳时间，我觉得条带不会跑这么快
赞一下 回复此楼
5楼2015-08-01 20:46:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶图好模糊啊，你的定量是多少？
感觉你的表达蛋白的上样量太少，或者电泳时候loading buffer不行，导致蛋白跑了
赞一下 回复此楼
早上一副睡不醒的样子，下午一副没睡醒的样子，晚上一副打了鸡血的样子！
6楼2015-08-03 10:06:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rendan911117

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-08-03 10:06:52
胶图好模糊啊，你的定量是多少？
感觉你的表达蛋白的上样量太少，或者电泳时候loading buffer不行，导致蛋白跑了

我在每个泳道加了12ul。  loading buffer是一直在用的  那我重新配一下。蛋白跑了  marker也会跟着跑出去是吗？
赞一下 回复此楼
7楼2015-08-04 15:09:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rendan911117

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhang001zh at 2015-07-31 18:36:35
没拍全不能完全确定，你看看分离胶上层有没有蛋白没有跑下来 没有的话就按maker分子量从大到小对应就行

上面的都跑下来了  这个应该是从大到小的了…
赞一下 回复此楼
8楼2015-08-04 15:09:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rendan911117

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by a86052 at 2015-08-01 20:46:54
如果15的胶，按照你的电压和电泳时间，我觉得条带不会跑这么快...

好的 那我再改一下胶的配方
赞一下 回复此楼
9楼2015-08-04 15:10:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

douyagreen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同认为应该注意一下胶浓度，另外，一般跑蛋白胶，溴酚蓝最好不要跑出去，其所指示的位置大约10kDa左右，利于观察。


by:我爱Bio网——生物工程与新医药研发服务平台
赞一下 回复此楼
10楼2015-08-05 12:59:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rendan911117 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 CyTWnZiM0cS6 2026-08-02 5/250 2026-08-02 20:52 by 3VGOm6paSgqv
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 CyTWnZiM0cS6 2026-08-02 3/150 2026-08-02 20:44 by 3VGOm6paSgqv
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 5/250 2026-08-02 20:31 by 3VGOm6paSgqv
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 7/350 2026-08-02 20:24 by 3VGOm6paSgqv
[基金申请] 这种情况还有戏吗 +5 drbart 2026-07-27 12/600 2026-08-02 20:21 by drbart
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 7/350 2026-08-02 20:11 by 3VGOm6paSgqv
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 13/650 2026-08-02 20:04 by 3VGOm6paSgqv
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 15/750 2026-08-02 19:54 by 3VGOm6paSgqv
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 21/1050 2026-08-02 19:52 by 3VGOm6paSgqv
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 9/450 2026-08-02 18:27 by ca3DVAx4OB19
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 20/1000 2026-08-02 18:04 by ca3DVAx4OB19
[基金申请] 准备明年的基金了 +7 Tide man 2026-07-27 7/350 2026-08-02 16:43 by gltch
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 15/750 2026-08-02 16:23 by jHcrHMhbKCFV
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +18 低垂的野花 2026-07-31 24/1200 2026-08-02 16:03 by swallowwh
[教师之家] 基础研究怎么拉横向，学校到款任务越来越多，难以完成 拉横向，都有哪些途径啊 +8 锦衣卫寒战 2026-07-28 10/500 2026-08-02 10:00 by 锦衣卫寒战
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 7/350 2026-08-02 07:59 by 88817753
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭