24小时热门版块排行榜    

查看: 1598  |  回复: 9

rendan911117

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白电泳,求助 已有4人参与

蛋白marker用的是生工的BM201,说明书上有9条带,我一直只有4-5条带。15%的分离胶,90+130V。一个半小时左右。
因为没办法确定marker出现的五条带对应的分子量是多少,所以没办法继续实验。图片是我跑的蛋白胶,中间的五条带的是marker。
跑过蛋白电泳的同学请帮我看看是哪里出了问题?谢谢大家!

蛋白电泳,求助
IMG_1477__1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这几条Marker应该是大的那几条。你这胶浓度确实是15%吗?觉得不太像啊
2楼2015-07-31 16:44:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rendan911117

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by a86052 at 2015-07-31 16:44:03
这几条Marker应该是大的那几条。你这胶浓度确实是15%吗?觉得不太像啊

我的配方是 低缓2.5ml 30%丙烯酰胺 5ml  水 2.5ml  过硫酸铵 50ul  TEMED 10ul     我想问一下 怎么才能看出这个胶不像是15%的胶  我是新接触这个实验  都不太懂
3楼2015-07-31 18:35:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang001zh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没拍全不能完全确定,你看看分离胶上层有没有蛋白没有跑下来 没有的话就按maker分子量从大到小对应就行

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-07-31 18:36:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a86052

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by rendan911117 at 2015-07-31 18:35:58
我的配方是 低缓2.5ml 30%丙烯酰胺 5ml  水 2.5ml  过硫酸铵 50ul  TEMED 10ul     我想问一下 怎么才能看出这个胶不像是15%的胶  我是新接触这个实验  都不太懂...

如果15的胶,按照你的电压和电泳时间,我觉得条带不会跑这么快
5楼2015-08-01 20:46:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
胶图好模糊啊,你的定量是多少?
感觉你的表达蛋白的上样量太少,或者电泳时候loading buffer不行,导致蛋白跑了
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
6楼2015-08-03 10:06:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rendan911117

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-08-03 10:06:52
胶图好模糊啊,你的定量是多少?
感觉你的表达蛋白的上样量太少,或者电泳时候loading buffer不行,导致蛋白跑了

我在每个泳道加了12ul。  loading buffer是一直在用的  那我重新配一下。蛋白跑了  marker也会跟着跑出去是吗?
7楼2015-08-04 15:09:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rendan911117

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhang001zh at 2015-07-31 18:36:35
没拍全不能完全确定,你看看分离胶上层有没有蛋白没有跑下来 没有的话就按maker分子量从大到小对应就行

上面的都跑下来了  这个应该是从大到小的了…
8楼2015-08-04 15:09:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rendan911117

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by a86052 at 2015-08-01 20:46:54
如果15的胶,按照你的电压和电泳时间,我觉得条带不会跑这么快...

好的 那我再改一下胶的配方
9楼2015-08-04 15:10:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

douyagreen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同认为应该注意一下胶浓度,另外,一般跑蛋白胶,溴酚蓝最好不要跑出去,其所指示的位置大约10kDa左右,利于观察。


by:我爱Bio网——生物工程与新医药研发服务平台
10楼2015-08-05 12:59:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rendan911117 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 272求调剂 +3 材紫有化 2026-02-28 3/150 2026-02-28 22:52 by ms629
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 290求调剂 +5 材料专硕调剂; 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:40 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 311求调剂 +8 南迦720 2026-02-28 8/400 2026-02-28 21:30 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料类求调剂 +6 wana_kiko 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:20 by gaoxiaoniuma
[考研] 284求调剂 +4 天下熯 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:13 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[考研] 272求调剂 +3 田智友 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:31 by 王加浩to
[考研] 298求调剂 +4 axyz3 2026-02-28 4/200 2026-02-28 11:21 by wang_dand
[基金申请] 面上可以超过30页吧? +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
信息提示
请填处理意见