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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 差异蛋白表达，求助！
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pqsp1219

新虫 (小有名气)

[求助] 差异蛋白表达，求助！ 已有3人参与

我想请教一下，我最近要做二维电泳，寻找差异性蛋白。具体过程是，我用一种药物抑制了细菌的蛋白表达（SDS-PSGE可以看到明显的蛋白条带差异），现在想进一步确定是哪一种蛋白。所以需要做二维电泳，但是，我一直有一个疑问，在寻找差异性蛋白时，是控制菌体量一致，还是蛋白量一致？谢谢
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认真做事
1楼 2014-10-29 21:32:36
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-29 22:14:08
既然是寻找差异蛋白，当然需要蛋白量差异明显，要不你如何挖点？！

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2楼2014-10-29 21:40:42
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pqsp1219

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-10-29 21:40:42
既然是寻找差异蛋白，当然需要蛋白量差异明显，要不你如何挖点？！

这个我知道，我是想问，寻找差异蛋白前，是控制菌体的量还是控制蛋白的量一致
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认真做事
3楼2014-10-30 09:55:01
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by pqsp1219 at 2014-10-30 09:55:01
这个我知道，我是想问，寻找差异蛋白前，是控制菌体的量还是控制蛋白的量一致...

应该是蛋白量一致，跟WB同理

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4楼2014-10-30 10:18:59
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hongqifei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确切来讲，应该是内参蛋白的量一致
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何须剑道争锋？千人指，万人封，可问江湖鼎峰，三尺秋水尘不染，天下无双。
5楼2014-10-30 16:28:34
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pqsp1219

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-10-30 10:18:59
应该是蛋白量一致，跟WB同理
...

但是如果控制蛋白量一致的话，就根本不能够真实的反应出对蛋白的影响啊，因为我不知道具体是对哪一个蛋白抑制，哪一个蛋白促进表达
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认真做事
6楼2014-11-01 18:55:03
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pqsp1219

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-10-30 10:18:59
应该是蛋白量一致，跟WB同理
...

但是如果控制蛋白量一致的话，就根本不能够真实的反应出对蛋白的影响啊，因为我不知道具体是对哪一个蛋白抑制，哪一个蛋白促进表达
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认真做事
7楼2014-11-01 18:55:23
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pqsp1219

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hongqifei at 2014-10-30 16:28:34
确切来讲，应该是内参蛋白的量一致

能不能具体的解释下，麻烦多谢。
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认真做事
8楼2014-11-01 18:55:50
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by pqsp1219 at 2014-11-01 18:55:03
但是如果控制蛋白量一致的话，就根本不能够真实的反应出对蛋白的影响啊，因为我不知道具体是对哪一个蛋白抑制，哪一个蛋白促进表达...

骚年，这个也有内参的啊！你应该也挖内参

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9楼2014-11-01 18:59:23
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pqsp1219

新虫 (小有名气)
严谨的Western Blot实验设计中要求有良好的参照体系，这对实验结果分析是非常有用。内参是最容易被忽略的一项。我们知道，要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中，目的蛋白表达量的相对多少，前提条件是等量的细胞上样，才有比较的基础。特别表达量不高时，上样量的差别就很可能影响结果的分析。所以你需要内参。
最主要是控制细胞上扬连。多谢各位了
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认真做事
10楼2014-11-02 10:05:20
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