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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE电泳出现问题，求助啊
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wenjiji85

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE电泳出现问题，求助啊

最近几天，跑胶不正常，实在不明白出了什么问题，向各位同学求助啊。

起初，是发现电泳的时候marker颜色不对，红色比较暗，蓝色很淡。
并且34kd、26kd两条靠的很近，而之前跑的每条带距离都差不多。
然后转膜后，用抗体检测不出蛋白。
下一次跑胶时，又出现了这种情况，我就没有转膜，直接用考马斯亮蓝染了一下，结果发现是这样。
虽然marker已经跑下去了，但是蛋白还集中在胶上段，电泳速度明显偏慢，并且和marker不一致。
这到底是为什么？有同学有经验吗？多谢啊！

电泳
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1楼 2011-12-07 16:28:25
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

loading的问题？要不就是蛋白太大  没进到胶里
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2楼2011-12-07 20:04:11
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wenjiji85

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by linyingjia at 2011-12-07 20:04:11:
loading的问题？要不就是蛋白太大  没进到胶里

谢谢回复~
但是染色的话，应该是从大到小一条都会有蛋白啊
不会全部是大蛋白吧
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3楼2011-12-07 20:41:31
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章信来

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

考虑下你蛋白样品处理的问题吧，比如蛋白处理和上样缓冲液，蛋白浓度，蛋白可溶性等问题。
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4楼2011-12-08 07:49:54
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生物大爆炸

新虫 (初入文坛)
换个蛋白上样试试

发自小木虫Android客户端
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5楼2018-11-08 18:47:04
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