应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】Tris-Gly电泳缓冲液的pH值问题（SDS-PAGE）
101/1返回列表
查看: 4864  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zplipeng

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】Tris-Gly电泳缓冲液的pH值问题（SDS-PAGE）

还原性不连续SDS-PAGE分离蛋白质时，利用了不同的缓冲液pH值特点来达到更好的分离蛋白的目的。
分子克隆指南要求：
分离胶（pH8.8），浓缩胶（pH6.8），Tris-Gly缓冲液（pH8.3）
但是，在Tris-Gly电极缓冲液配制 时并没有说明要求调节pH至8.3，但是原理上分析是需要8.3的pH值的。
在实际的溶液配制时，却发现5X缓冲液的pH值为8.7，问一下各位是药品的问题么？各位有没有亲自测过pH值的，是不是需要调节到8.3再使用呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-12-08 17:40:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rivers_123

铁虫 (小有名气)
zplipeng(金币+3): 2011-04-26 08:10:31
Tris-Gly调出来时8.3 合适，我们是10*的
赞一下 回复此楼
2楼2010-12-10 14:05:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zplipeng

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by rivers_123 at 2010-12-10 14:05:21:
Tris-Gly调出来时8.3 合适，我们是10*的

这位的意思是说：稀释到1倍时，是8.3是么？？？
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-11 08:59:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)
zplipeng(金币+2): 2011-04-26 08:10:42
我还真的没有测过呢，不过蛋白分开得还不错
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-11 09:09:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
zplipeng(金币+3): 2011-04-26 08:10:51
引用回帖:
Originally posted by zplipeng at 2010-12-08 17:40:58:
还原性不连续SDS-PAGE分离蛋白质时，利用了不同的缓冲液pH值特点来达到更好的分离蛋白的目的。
分子克隆指南要求：
分离胶（pH8.8），浓缩胶（pH6.8），Tris-Gly缓冲液（pH8.3）
但是，在Tris-Gly电极缓冲液配 ...

呵呵，一般来说不用调的，1*的大概就是8.3左右。当然这跟你们所用水的pH也有一点关系。

汪家政的那本书上是说不用调的，所以一直也不调。我们一次配20L的10*buffer，也没有调。跑出来的图也很漂亮。
赞一下 回复此楼
5楼2010-12-11 10:33:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianhuijuan

金虫 (小有名气)
zplipeng(金币+1): 2011-04-26 08:10:58
本人实验室常配的是5×电泳缓冲液，也没调节过pH,图也很好。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-12-11 16:56:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianhuijuan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zplipeng at 2010-12-11 08:59:28:

这位的意思是说：稀释到1倍时，是8.3是么？？？

稀释前后不变。
回复此楼
7楼2010-12-11 16:58:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainwander

铁杆木虫 (知名作家)
zplipeng(金币+1): 2011-04-26 08:11:03
一直就没有测过pH到底是多少，

只是直接配完稀释用就行，

效果一样很好
赞一下 回复此楼
8楼2010-12-12 00:33:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guang012345

新虫 (初入文坛)
我们做的时候好像也是没有调PH的，我用的也是5X的缓冲液
赞一下 回复此楼
9楼2011-01-14 22:06:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rivers_123

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
是将10*调到8.3，然后跑胶用稀释好的1*(900ddH2O+100母液）1h，转得时候用1*Transfer 3h就可以了。但蛋白的分子量不同转得时间也有差异，还有转膜注意事项等，比如，大分子蛋白用厚胶转时间就要长些，嘿嘿
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-09-21 18:54:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zplipeng 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-04 6/300 2026-08-04 13:28 by jzdxtiUmJ6PL
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 7/350 2026-08-04 13:22 by jzdxtiUmJ6PL
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 11/550 2026-08-04 12:58 by jzdxtiUmJ6PL
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 7/350 2026-08-04 11:31 by MWRYsWbJw4DE
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:26 by MWRYsWbJw4DE
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 17/850 2026-08-04 09:46 by archvillain
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 f1dmPx051StA 2026-08-03 7/350 2026-08-04 09:31 by v1TJC4qJauAB
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 5/250 2026-08-04 09:27 by v1TJC4qJauAB
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 09:17 by v1TJC4qJauAB
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 10/500 2026-08-04 09:15 by v1TJC4qJauAB
[基金申请] 系统今天又提示维护了，估计离放榜不远了 +12 winnerche 2026-07-29 16/800 2026-08-04 08:18 by Equinoxhua
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 07:37 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 6/300 2026-08-04 04:47 by k7OM8YghWbkC
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[高分子] UV压敏胶开发 +3 ichall 2026-07-30 5/250 2026-08-03 14:40 by Sunrisepay
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +19 低垂的野花 2026-07-31 25/1250 2026-08-03 09:25 by gy116024
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭