| 查看: 6420 | 回复: 5 | ||
[求助]
如何处理后盐酸胍变性的蛋白液，跑SDS-PAGE电泳。 已有1人参与
|
| 最近在做蛋白的纯化，蛋白分离后，用盐酸胍变性，通过AKTA纯化蛋白，但没有收集到蛋白。想知道蛋白液是否在挂柱子时流失，想对挂柱子的流出液跑SDS-PAGE胶检测，但是流出液中有盐酸胍，遇到loadingbuffere 析出白色物质，无法跑电泳，这里求助高手，怎样处理含有盐酸胍的样本来跑SDS-PAGE电泳。先谢谢谢谢啦，请各位高手多多帮助 |
回复此楼» 猜你喜欢
材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐
已经有8人回复
-
0703 物理化学调剂
已经有5人回复
-
化学工程321分求调剂
已经有7人回复
-
0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投
已经有7人回复
-
308求调剂
已经有3人回复
-
本人考085602 化学工程 专硕
已经有10人回复
-
焦虑
已经有9人回复
-
0856求调剂
已经有3人回复
-
283求调剂
已经有11人回复
-
深圳大学硕士招生（2026秋，传感器方向，仅录取第一志愿）
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- SDS-PAGE电泳为什么一开始采用低电压
已经有9人回复
- SDS-PAGE电泳的电极缓冲液可以重复使用么？
已经有3人回复
- 急~~~！！！sds-page电泳，重复了n次，都是这种死样子！
已经有10人回复
- SDS-PAGE凝胶电泳跑出来的条带问题
已经有20人回复
- SDS-page 电泳时，样品很粘稠，跑不太动
已经有12人回复
- SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳成像结果的若干问题
已经有6人回复
- Tricine SDS PAGE蛋白电泳问题
已经有4人回复
- SDS-PAGE电泳样品及MARKER跑不开
已经有6人回复
- 急求，怎么出去变性后蛋白质中的盐酸胍
已经有8人回复
- SDS-page电泳蛋白样的处理
已经有4人回复
- 就要被蛋白质电泳（SDS-PAGE）灭了，有图有真相，望高手指点
已经有28人回复
- SDS-PAGE蛋白质电泳，电泳迁移率只与分子量相关吗？
已经有11人回复
- SDS-PAGE 电泳蛋白分子量飘移
已经有12人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳
已经有23人回复
- 蛋白电泳液问题
已经有12人回复
- 请教盐酸胍助溶冻干蛋白干粉时，羟胺裂解后 ，跑电泳问题！！！！
已经有5人回复
- SDS-PAGE电泳求助
已经有13人回复
- SDS-PAGE 凝胶电泳的Marker使用
已经有12人回复
- SDS-PAGE电泳蛋白质变性
已经有7人回复
- 如何跑SDS-PAGE大分子量电泳
已经有3人回复
- SDS-PAGE电泳，菌液总蛋白，染色后显示的是弥散的
已经有5人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳条带问题
已经有7人回复
- 【求助】急！有木有做过Tricine－SDS－PAGE小分子蛋白电泳的进！
已经有32人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE蛋白电泳 样品中盐浓度和pH值对条带有影响？
已经有13人回复
anyaxiong
铁杆木虫 (知名作家)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 8751.8
- 散金: 2291
- 红花: 26
- 沙发: 63
- 帖子: 8730
- 在线: 743.1小时
- 虫号: 974100
- 注册: 2010-03-17
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhangjie_924: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 非常感谢 2014-05-12 09:50:08
感谢参与，应助指数 +1
zhangjie_924: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 非常感谢 2014-05-12 09:50:08
| 盐酸胍处理的蛋白经过处理后是可以用来进行SDS-PAGE的，具体做法如下：1份（如50ul）盐酸胍溶解的蛋白和9份(450ul)预冷的无水乙醇，混匀，-20摄氏度静置5min，4℃，13000rpm离心10min，弃上清，然后用1ml预冷的75%的酒精将肉眼可见的蛋白团块重新悬浮起来，-20摄氏度静置5min，4℃，13000rpm离心10min，弃上清，然后用50ul 5×Loading buffer 溶解蛋白团块，剩下来的就剩下煮样跑胶了 |
2楼2014-05-09 20:25:19
3楼2014-05-12 10:20:04
anyaxiong
铁杆木虫 (知名作家)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 8751.8
- 散金: 2291
- 红花: 26
- 沙发: 63
- 帖子: 8730
- 在线: 743.1小时
- 虫号: 974100
- 注册: 2010-03-17
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2014-05-12 18:35:54
YangKang7057
金虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1113.4
- 红花: 3
- 帖子: 571
- 在线: 69.3小时
- 虫号: 585260
- 注册: 2008-08-08
- 性别: GG
- 专业: 药物设计与药物信息
5楼2014-06-12 15:02:05
6楼2016-01-24 19:16:50
