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skynoline

铜虫 (初入文坛)

[求助] 如何跑SDS-PAGE大分子量电泳

我想跑160KDaD分子量的蛋白质的SDS-PAGE电泳,请问如何选着胶的浓度或者电泳的配方呢?
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cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+6, EPI+1): good 2011-05-10 08:37:49
dhd997: 下次请选择回帖应助,不然楼主无法加分哦 2011-05-10 08:38:36
skynoline(金币+1): 2011-06-07 11:09:28
SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围
6%胶 50-160kD
8%胶 30-90kD
10%胶 20-80kD
12%胶 12-60kD
15%胶 10-40kD

   
配制6%的PAGE分离胶
成分 所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积 7.5 10 12 15 20 30
蒸馏水 3.0 4.0 4.8 6.0 8.0 12.0
Acr-Bis 1.5 2.0 2.4 3.0 4.0 6.0
分离胶缓冲液(A) 2.85 3.8 4.6 5.7 7.6 11.4
SDS 0.075 0.1 0.12 0.15 0.2 0.3
APS 0.075 0.1 0.12 0.15 0.2 0.3
TEMED 0.006 0.008 0.096 0.012 0.016 0.024
2楼2011-05-09 23:38:20
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skynoline

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by cdl007 at 2011-05-09 23:38:20:
SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围
6%胶 50-160kD
8%胶 30-90kD
10%胶 20-80kD
12%胶 12-60kD
15%胶 10-40kD

   
配制6%的PAGE分离胶
成分 所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积 7.5 10 12 15 20 30 ...

你好,谢谢你的回复!我还想问下你的丙烯酰胺的交联度是多少?2.6%吗?还有SDS和APS都是10%的吗?
3楼2011-05-17 10:02:46
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256k

新虫 (正式写手)

交流下,丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的比例你们用的多少?这个比例是指的质量比还是摩尔比?
4楼2013-04-07 11:48:34
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