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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-page 电泳时，样品很粘稠，跑不太动
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听说你嫁了

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-page 电泳时，样品很粘稠，跑不太动 已有2人参与

样品如果不稀释的话，因为样品很粘稠，有点跑不动，而且跑完后未经染色，整个泳道已经有样品原来的颜色了，如果将其稀释后，样品浓度又太低，看不到目的条带，如图，左边的浓度比较大，所以染色后成这样子，右边的稀释后，粘性就比较小了，可是又看不到目的条带了，请问能有什么办法可以解决这个问题吗，怎么样才能跑到胶？
SDS-page 电泳时，样品很粘稠，跑不太动
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其实是傻瓜
1楼 2013-07-22 19:23:48
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回帖置顶 ( 共有1个 )

Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare: 金币+3, BioEPI+1, 应助指数+1, 谢谢参与 2013-08-01 10:57:10
如果目的蛋白可溶建议离心，取上清进行跑胶，如果不可溶，用8 M尿素，6M盐酸胍进行溶解后，离心，取上清跑胶！Good luck！
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互助互励，共奋共进！！
11楼2013-08-01 09:00:37
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-23 22:43:48
稀释样品，增加点样体积。我觉得你的4个样品中，第三个还可以。你要的条带是染出来那条吗？
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2楼2013-07-23 00:42:48
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主你的样品里面粘的东西就是你要看的蛋白?
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3楼2013-07-23 01:38:00
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用含高浓度NaCl的溶液溶解, 最终NaCl浓度调到200-300mM
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2013-07-23 04:01:13
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yakir

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
样??应该糖基化程度比较高，用去糖基化酶酶切一下，然???把酶切??和酶切???的放在一起跑一张，应该看上去会??错的。
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一步一步！
5楼2013-07-23 13:41:29
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yakir

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-23 22:44:11
怎么会是乱码呢？
样品糖基化程度比较高，用去糖基化酶酶切一下再跑电泳应该就好了。
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一步一步！
6楼2013-07-23 13:43:04
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zhaoxr0311

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-23 22:44:18
粘的东西是什么？可以适当把胶的浓度降低
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7楼2013-07-23 13:56:51
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biomed_fanyi

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你的样品时什么？　细胞裂解液？

你试一下把样品用小号针头的注射器抽几下。
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8楼2013-07-26 10:18:47
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忘性大啊

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare: 金币+3, 欢迎新虫发帖交流 2013-07-29 11:57:16
silicare: 应助指数+1 2013-07-29 11:57:22
制好样品后沸水浴20-30min再跑胶。制样时要将样品吹打混匀。
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9楼2013-07-29 10:59:29
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秋水素心

银虫 (小有名气)
楼主你煮样后上样前没离心吧
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认真过好每一天！
10楼2013-07-31 19:55:03
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