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如何处理后盐酸胍变性的蛋白液，跑SDS-PAGE电泳。 已有1人参与
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| 最近在做蛋白的纯化，蛋白分离后，用盐酸胍变性，通过AKTA纯化蛋白，但没有收集到蛋白。想知道蛋白液是否在挂柱子时流失，想对挂柱子的流出液跑SDS-PAGE胶检测，但是流出液中有盐酸胍，遇到loadingbuffere 析出白色物质，无法跑电泳，这里求助高手，怎样处理含有盐酸胍的样本来跑SDS-PAGE电泳。先谢谢谢谢啦，请各位高手多多帮助 |
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3楼2014-05-12 10:20:04
anyaxiong
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zhangjie_924: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 非常感谢 2014-05-12 09:50:08
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zhangjie_924: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 非常感谢 2014-05-12 09:50:08
| 盐酸胍处理的蛋白经过处理后是可以用来进行SDS-PAGE的，具体做法如下：1份（如50ul）盐酸胍溶解的蛋白和9份(450ul)预冷的无水乙醇，混匀，-20摄氏度静置5min，4℃，13000rpm离心10min，弃上清，然后用1ml预冷的75%的酒精将肉眼可见的蛋白团块重新悬浮起来，-20摄氏度静置5min，4℃，13000rpm离心10min，弃上清，然后用50ul 5×Loading buffer 溶解蛋白团块，剩下来的就剩下煮样跑胶了 |
2楼2014-05-09 20:25:19
anyaxiong
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4楼2014-05-12 18:35:54
YangKang7057
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