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zhouxianglzy

新虫 (小有名气)

[求助] 糖,蛋白电泳求助 已有2人参与

荧光电泳:蛋白(4300Da)带负电,多糖(2600Da)带负电,亮色的条带只有糖,暗的条带是糖和蛋白相互作用的。点样时候,糖的质量是相同的,为什么只有糖的条带亮,而相互作用的条带是暗的呢?为什么一个条带窄一个条带宽?为什么跑出来的电泳都是头部尖尖的,不是平的呢?小妹做电泳已经四五个月了,被折磨了好久,求各位大神显神通,指导小妹一把,小妹在这里感激涕零了!

糖,蛋白电泳求助
20150310 电泳结果.png
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匿名

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2楼2015-03-10 23:26:08
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zhouxianglzy

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 立林258369 at 2015-03-10 23:26:08
请问是sds page胶吗?

不是 没有加sds

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2015-03-11 10:51:21
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caokuai1

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你好,我以前也跑过糖的电泳图,不知道你的是多糖吗?多糖跑出来的电泳就是这样的,很难像蛋白一样跑的那么漂亮。还有你跑的是什么胶?

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4楼2015-03-11 15:02:57
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zhouxianglzy

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by caokuai1 at 2015-03-11 15:02:57
你好,我以前也跑过糖的电泳图,不知道你的是多糖吗?多糖跑出来的电泳就是这样的,很难像蛋白一样跑的那么漂亮。还有你跑的是什么胶?

非变性的聚丙烯酰胺。胶的浓度时6%。我想问一下这个胶的浓度到底怎么计算的?
5楼2015-03-11 20:03:05
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帖航

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
糖白电泳就是弥散的,6%是胶里面ACR的含量(例:100ml胶里面含0.6g的ACR)。另外你的电泳分析是不是有问题,亮的是糖,暗的应该还是糖,怎么可能是糖和蛋白互做呢。从图上看分子量是一样的,如果是互做分子量变化应该很大的,电泳差异应该很大。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2015-03-13 09:10:08
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caokuai1

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zhouxianglzy at 2015-03-11 20:03:05
非变性的聚丙烯酰胺。胶的浓度时6%。我想问一下这个胶的浓度到底怎么计算的?...

你的是大胶还是小胶,多糖最好用大胶。梯度胶也会更好点。胶的浓度我是参考文献来的,具体的我现在也记不得了,你可以看一下英文文献。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

7楼2015-03-13 10:30:12
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zhouxianglzy

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 帖航 at 2015-03-13 09:10:08
糖白电泳就是弥散的,6%是胶里面ACR的含量(例:100ml胶里面含0.6g的ACR)。另外你的电泳分析是不是有问题,亮的是糖,暗的应该还是糖,怎么可能是糖和蛋白互做呢。从图上看分子量是一样的,如果是互做分子量变化应 ...

对,你说的很对,我现在就是怀疑糖和蛋白没有结合上。但是不知道蛋白去了哪里?
8楼2015-03-17 12:25:40
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zhouxianglzy

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by caokuai1 at 2015-03-13 10:30:12
你的是大胶还是小胶,多糖最好用大胶。梯度胶也会更好点。胶的浓度我是参考文献来的,具体的我现在也记不得了,你可以看一下英文文献。...

我用的是小胶,我是6%的胶。文献我也看了 现在就是不知道配胶的时候用什么缓冲液溶解?
9楼2015-03-17 12:27:22
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zhouxianglzy

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 帖航 at 2015-03-13 09:10:08
糖白电泳就是弥散的,6%是胶里面ACR的含量(例:100ml胶里面含0.6g的ACR)。另外你的电泳分析是不是有问题,亮的是糖,暗的应该还是糖,怎么可能是糖和蛋白互做呢。从图上看分子量是一样的,如果是互做分子量变化应 ...

还有应该加浓缩胶吧?
10楼2015-03-17 12:28:38
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