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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 求助WB加样跑电泳的问题
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比克贝吉塔

新虫 (小有名气)

[求助] 求助WB加样跑电泳的问题 已有1人参与

每个孔里应该加多少样品？怎么算出来的？还有空白对照和标准液是怎么回事？本人小白一个。。。
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1楼 2014-10-02 22:45:26
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小漪君

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-03 22:17:07
按顺序向凝胶样品槽中加入标准蛋白和未知蛋白样品，每孔的加样量要相同，一般加样体积为
10~30µl，加样时枪头深入到加样槽内，尽量接近底部，记录加样顺序
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比克贝吉塔
2楼2014-10-03 00:36:23
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小漪君

铜虫 (小有名气)
网上有个帖子叫“WB原理、步骤及总结”。恁搜一下
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3楼2014-10-03 00:37:43
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比克贝吉塔

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小漪君 at 2014-10-03 00:36:23
按顺序向凝胶样品槽中加入标准蛋白和未知蛋白样品，每孔的加样量要相同，一般加样体积为
10~30µl，加样时枪头深入到加样槽内，尽量接近底部，记录加样顺序

按什么顺序加呢？

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4楼2014-10-03 06:28:56
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比克贝吉塔

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小漪君 at 2014-10-03 00:37:43
网上有个帖子叫“WB原理、步骤及总结”。恁搜一下

看了一遍，这几个问题还是不懂啊，求解答
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5楼2014-10-03 21:13:03
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小漪君

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 比克贝吉塔 at 2014-10-03 21:13:03
看了一遍，这几个问题还是不懂啊，求解答...

问导师吧
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6楼2014-10-04 00:43:09
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表里不一的

新虫 (初入文坛)
加多少得看你的空多大了，一般普通的1.5厚10空的加20-25ug蛋白条带挺好看的，15空的8-12ug挺好，你要是加的多了，抗体就稀释比例大些。体积的话一般10空的20ul左右，15孔的10ul左右。
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比克贝吉塔
7楼2014-10-08 14:41:45
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比克贝吉塔

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 表里不一的 at 2014-10-08 14:41:45
加多少得看你的空多大了，一般普通的1.5厚10空的加20-25ug蛋白条带挺好看的，15空的8-12ug挺好，你要是加的多了，抗体就稀释比例大些。体积的话一般10空的20ul左右，15孔的10ul左右。

谢谢！

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8楼2014-10-09 05:58:57
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