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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 双向电泳蛋白样品出现的问题，求助啊
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荷子围脖

铁虫 (初入文坛)

[求助] 双向电泳蛋白样品出现的问题，求助啊

各位前辈，有没有遇到这样的情况啊：双向电泳蛋白样品从冰箱拿出溶化后，不是呈现液体，而是类似胶状物的，这是怎么回事啊?求各位前辈指教啊，小女子谢过了！还有有哪位是做细菌蛋白的双向电泳方面的，希望可以加我，共同讨论问题。
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1楼 2013-10-11 09:22:14
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eagles123

金虫 (正式写手)
你的蛋白是怎么提取的？
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2楼2013-10-11 10:40:29
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贤愚Libra

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是蛋白提取不纯吧
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www------sr-------------
3楼2013-10-11 12:20:04
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candice1009

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-10-11 19:22:09
我以前做过烟草的也会有这种情况，蛋白含量很低，你是否测过蛋白含量。这种情况如果蛋白浓度够上样量就可以试一下过柱

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2013-10-11 14:24:29
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phoenix211

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白不纯吧  以前提过太子参根部的总蛋白  上一向前也是很粘稠的  类似鼻涕状 因为多糖含量高
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5楼2013-10-12 16:03:12
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荷子围脖

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by eagles123 at 2013-10-11 10:40:29
你的蛋白是怎么提取的？

细菌菌体收集好并洗过之后，加入裂解液，放置一段时间后超声，600W，20min，12000r/min离心15min去除细胞碎片，按照上清：丙酮=1:2的量加入丙酮，放入冰箱中过夜沉淀，然后12000r/min，离心30min,在用丙酮洗一次放到通风橱挥发丙酮，得到的蛋白样品用水化液溶解。以前没有出现这样的情况的，这一次不知道是怎么回事，刚提取出来的时候也挺好的，用了好几次了，知道上次才出现这样的情况的
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6楼2013-10-12 18:46:56
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荷子围脖

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 贤愚Libra at 2013-10-11 12:20:04
应该是蛋白提取不纯吧

可是之前的用的样品和这次的是一样的，跑出来的图还挺好的
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7楼2013-10-12 18:48:05
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荷子围脖

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by candice1009 at 2013-10-11 14:24:29
我以前做过烟草的也会有这种情况，蛋白含量很低，你是否测过蛋白含量。这种情况如果蛋白浓度够上样量就可以试一下过柱

我做过定量，可是每次测出的结果相差很大，而且和单向电泳的结果也出入较大，所以之后我是根据单向的条带上样的
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8楼2013-10-12 18:49:26
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荷子围脖

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by phoenix211 at 2013-10-12 16:03:12
蛋白不纯吧  以前提过太子参根部的总蛋白  上一向前也是很粘稠的  类似鼻涕状 因为多糖含量高

对啊，我的也是这样的，可是之前并没有呈现粘稠状啊，是不是在冰箱放的时间问题啊
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9楼2013-10-12 18:50:43
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荷子围脖

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by candice1009 at 2013-10-11 14:24:29
我以前做过烟草的也会有这种情况，蛋白含量很低，你是否测过蛋白含量。这种情况如果蛋白浓度够上样量就可以试一下过柱

请您详细说一下过柱的情况吧，谢谢！
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10楼2013-10-12 20:24:34
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