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荷子围脖

铁虫 (初入文坛)

[求助] 双向电泳蛋白样品出现的问题,求助啊

各位前辈,有没有遇到这样的情况啊:双向电泳蛋白样品从冰箱拿出溶化后,不是呈现液体,而是类似胶状物的,这是怎么回事啊?求各位前辈指教啊,小女子谢过了!还有有哪位是做细菌蛋白的双向电泳方面的,希望可以加我,共同讨论问题。
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eagles123

金虫 (正式写手)

你的蛋白是怎么提取的?
2楼2013-10-11 10:40:29
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贤愚Libra

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是蛋白提取不纯吧
www------sr-------------
3楼2013-10-11 12:20:04
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candice1009

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-10-11 19:22:09
我以前做过烟草的也会有这种情况,蛋白含量很低,你是否测过蛋白含量。这种情况如果蛋白浓度够上样量就可以试一下过柱

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2013-10-11 14:24:29
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phoenix211

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白不纯吧  以前提过太子参根部的总蛋白  上一向前也是很粘稠的  类似鼻涕状 因为多糖含量高
5楼2013-10-12 16:03:12
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铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by eagles123 at 2013-10-11 10:40:29
你的蛋白是怎么提取的?

细菌菌体收集好并洗过之后,加入裂解液,放置一段时间后超声,600W,20min,12000r/min离心15min去除细胞碎片,按照上清:丙酮=1:2的量加入丙酮,放入冰箱中过夜沉淀,然后12000r/min,离心30min,在用丙酮洗一次放到通风橱挥发丙酮,得到的蛋白样品用水化液溶解。以前没有出现这样的情况的,这一次不知道是怎么回事,刚提取出来的时候也挺好的,用了好几次了,知道上次才出现这样的情况的
6楼2013-10-12 18:46:56
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荷子围脖

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 贤愚Libra at 2013-10-11 12:20:04
应该是蛋白提取不纯吧

可是之前的用的样品和这次的是一样的,跑出来的图还挺好的
7楼2013-10-12 18:48:05
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荷子围脖

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by candice1009 at 2013-10-11 14:24:29
我以前做过烟草的也会有这种情况,蛋白含量很低,你是否测过蛋白含量。这种情况如果蛋白浓度够上样量就可以试一下过柱

我做过定量,可是每次测出的结果相差很大,而且和单向电泳的结果也出入较大,所以之后我是根据单向的条带上样的
8楼2013-10-12 18:49:26
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荷子围脖

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by phoenix211 at 2013-10-12 16:03:12
蛋白不纯吧  以前提过太子参根部的总蛋白  上一向前也是很粘稠的  类似鼻涕状 因为多糖含量高

对啊,我的也是这样的,可是之前并没有呈现粘稠状啊,是不是在冰箱放的时间问题啊
9楼2013-10-12 18:50:43
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荷子围脖

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by candice1009 at 2013-10-11 14:24:29
我以前做过烟草的也会有这种情况,蛋白含量很低,你是否测过蛋白含量。这种情况如果蛋白浓度够上样量就可以试一下过柱

请您详细说一下过柱的情况吧,谢谢!
10楼2013-10-12 20:24:34
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