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hrjxx

新虫 (小有名气)

[求助] 双向电泳，等电聚焦后，胶条酸端，总是能看到白色蛋白，这该怎么解决啊 ？？？？

大家好啊
我做牛肉蛋白的等电聚焦，聚焦结束之后，在胶条的酸性端总是出现白色蛋白沉淀物，这是怎么回事啊 。大家有没有什么解决的好方法啊？？？请指教啊 ，至于分数，我还可以追加，只有能帮助我解决这个问题！！！
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1楼 2012-04-27 13:21:52
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
啊...太久没做蛋白电泳了~~~不过LZ如何能这么肯定+极的白色沉淀是蛋白质呢？我记得IEF电极有盐离子析出是正常的，可以通过在胶条和电极之间加浸有DTT溶液的滤纸片来改善这种状况。建议LZ去bio-rad、生物谷、丁香园等网站上找找资料。
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2楼2012-04-27 14:29:32
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wr123456

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-28 09:26:11
hrjxx: 金币+3, 你那电泳效果好啊？？我的为什么蛋白点少呢？？？ 2012-05-02 12:49:25
这个酸性端有白色沉淀，很可能是因为样品浓度过高，仍有蛋白质未聚焦完全，我也出现过这种情况，二次平衡后这种沉淀会消失，关键是等电聚焦电压能上升到预定电压。

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We must accept finite disap disappointment, but we must never lose infinite hope. -- Mattin Luther King
3楼2012-04-28 07:42:08
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wuxlin0

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hrjxx: 金币+2, 谢谢啊，这刚开始呢，主要是我蛋白点很少，再沉淀更少了啊 2012-05-02 10:51:12
不影响吧，如果酸性端没你的目的蛋白，如果有，就再加一个pH3一6的2-DE

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4楼2012-05-01 14:31:50
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hrjxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by holyala at 2012-04-27 14:29:32:
啊...太久没做蛋白电泳了~~~不过LZ如何能这么肯定+极的白色沉淀是蛋白质呢？我记得IEF电极有盐离子析出是正常的，可以通过在胶条和电极之间加浸有DTT溶液的滤纸片来改善这种状况。建议LZ去bio-rad、生物谷、丁香园 ...

谢谢啊，白色不透明的，不会是盐的结晶吧，还有就是不但酸端，中间一块也有沉淀呢
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5楼2012-05-02 10:48:36
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wuxlin0

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-02 18:55:33
蛋白点少可以多提点样品，加大上样量，同时多做几个不同pH范围的胶条，可考虑用银染，祝实验顺利

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6楼2012-05-02 17:18:30
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xiucai_2012

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我的跑出来也有，我去过一个师姐跑的，她们的胶条上也有，据说是公司在设计的时候做上去的标记，没有关系的
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7楼2012-12-21 22:55:46
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