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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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hrjxx

新虫 (小有名气)

[求助] 双向电泳,溴酚蓝需要过滤吗?

我做双向,电压上不去,好像是溴酚蓝的原因,请问,在双向电泳里,溴酚蓝是不是需要预先过滤啊??
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hrjxx

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by Rubisco580 at 2012-04-12 14:35:32:
我做过肝癌组织。1万伏比较顺利上去。
建议楼主在制样上多下工夫,控制盐离子浓度。

谢谢啊,你是用试剂盒,还是传统方法啊》》有用试剂盒除盐吗??不知道能不能提供一个你的制样的PROTOCOL 啊??
7楼2012-04-12 14:45:34
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hrjxx

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by guxinhan123 at 2012-04-13 13:54:16:
真怀疑是溴酚蓝的原因可以不放的,我现在几乎都没放过,不影响实验。不知楼主做什么材料?蛋白提取方法如何?

你好啊,我做的是肌肉组织蛋白,不知道楼上用的是什么提取方法啊,我用的丙酮沉淀,然后裂解液裂解,离心的(貌似说这是植物的提法),但是效果不好,不知道你是否有成熟的方法啊??
11楼2012-04-13 19:23:46
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普通回帖

telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

电压和溴酚蓝有必然联系吗?最多是不好进样或是进的不好
应该还是你的槽子哪里短路了吧
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
2楼2012-04-12 08:31:43
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hrjxx: 金币+1, 有帮助, 谢谢啊,你是做等电聚焦吗,你的溴酚蓝是进口的还是??过滤是去除杂质,还是去除不溶的啊? 2012-04-12 14:25:08
我实验室操作时溴酚蓝需要过滤,用一般国产的滤头就可以。
hehe
3楼2012-04-12 08:33:57
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Rubisco580

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助,谢谢分享 2012-04-12 13:48:04
hrjxx: 金币+2, 谢谢,我用的国产溴酚蓝呢,你那样也就是不用过滤了,那你的电压都可以很顺利,上去吗??请问你做的是什么组织啊?? 2012-04-12 14:26:30
电压上不去,更多的原因是样品盐离子浓度高,就是制样问题。溴酚蓝的影响不是很显著。
可以告诉楼主个小窍门,我们用的进口溴酚蓝,不配溶液,使用的时候颠倒一下,再取下盖子,对着烧杯弹几下,溶液就蓝了。几下就够。
4楼2012-04-12 11:17:02
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hrjxx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-04-12 08:31:43:
电压和溴酚蓝有必然联系吗?最多是不好进样或是进的不好
应该还是你的槽子哪里短路了吧

呵呵,谢谢斑竹啊 ,我说的是等电聚焦呢,不是垂直电泳啊
5楼2012-04-12 14:24:05
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Rubisco580

金虫 (小有名气)

我做过肝癌组织。1万伏比较顺利上去。
建议楼主在制样上多下工夫,控制盐离子浓度。

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6楼2012-04-12 14:35:32
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Rubisco580

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by hrjxx at 2012-04-12 14:45:34:
谢谢啊,你是用试剂盒,还是传统方法啊》》有用试剂盒除盐吗??不知道能不能提供一个你的制样的PROTOCOL 啊??

传统方法,裂解液+超声破碎。
除盐的话有clean-up试剂盒,但是蛋白丢失严重,看你的实验需求了。
很久之前做的了,具体参数记不清了。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2012-04-12 15:02:05
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hrjxx

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by Rubisco580 at 2012-04-12 15:02:05:
传统方法,裂解液+超声破碎。
除盐的话有clean-up试剂盒,但是蛋白丢失严重,看你的实验需求了。
很久之前做的了,具体参数记不清了。

谢谢啊,有用试剂盒来除盐吗?你做的时候,或者说用过丙酮沉淀没??
9楼2012-04-12 15:09:28
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guxinhan123

银虫 (正式写手)

真怀疑是溴酚蓝的原因可以不放的,我现在几乎都没放过,不影响实验。不知楼主做什么材料?蛋白提取方法如何?

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10楼2012-04-13 13:54:16
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