24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2517  |  回复: 6

雨中的雕塑

银虫 (小有名气)

[求助] 蛋白酶k消化

各位虫友,我是刚开始做分子,实验的目的提取鱼的dna,用的是鱼尾动脉血,用蛋白酶在60度水浴消化了3个小时,没跑出来条带,然后试着用蛋白酶在60度水浴消化了一夜结果一种鱼的dna条带跑出来了 ,另外的两种鱼的dna条带没有,求解?然后又试着用蛋白酶在60度水浴中消化了一夜加半天,然后发现又都没有条带了,求解?
回复此楼
我愿天下人:人人得以智慧之光,去开启生命之真谛
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
雨中的雕塑: 金币+1 2012-04-08 10:36:30
我用蛋白酶K 消化的温度是56,过夜,一般是下午5点多放到水浴锅,第二天早上9点开始做实验
2楼2012-04-07 21:45:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


雨中的雕塑: 金币+1, 有帮助 2012-04-08 10:36:41
另外你做的基因的时候,有没有做个内参,还有,你的体系的各个浓度都对着么
3楼2012-04-07 21:47:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨中的雕塑

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mamadexiao at 2012-04-07 21:45:49:
我用蛋白酶K 消化的温度是56,过夜,一般是下午5点多放到水浴锅,第二天早上9点开始做实验

那跟我第二次做的时间是查不多的啊   为什么一条鱼dna条带跑出来了 另外两个条带没有出来那。。是不是酶的问题
我愿天下人:人人得以智慧之光,去开启生命之真谛
4楼2012-04-08 10:35:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨中的雕塑

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by mamadexiao at 2012-04-07 21:47:09:
另外你做的基因的时候,有没有做个内参,还有,你的体系的各个浓度都对着么

体系各个浓度应该是没有问题的
我愿天下人:人人得以智慧之光,去开启生命之真谛
5楼2012-04-08 10:36:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小逍遥人

金虫 (正式写手)

张斌猪

引用回帖:
5楼: Originally posted by 雨中的雕塑 at 2012-04-08 10:36:19
体系各个浓度应该是没有问题的...

一般加蛋白酶K是效果是去除蛋白的,对提取实验是增强效果,比较大的可能是提取出问题,如果你怀疑酶有问题,那就要看你的蛋白酶K是不是DNAse和 RNAse free     如果不是  那就比较大的影响
生命还需要奇迹来衬托
6楼2012-09-11 08:53:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们提基因组的时候一般用蛋白酶K 50度水浴消化五小时以上,很多都是过夜啊,挺好的。
希望实验能顺利!
7楼2012-09-11 15:58:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 雨中的雕塑 的主题更新
信息提示
请填处理意见