| 查看: 1705 | 回复: 8 | ||
[求助]
蛋白质SDS-PAGE跑的条带很多，但做二维电泳点很少，且纵条纹很多，请教什么原因呢？
|
| 提蛋白质，先做个小胶SDS-PAGE，跑出来的条带挺多，也挺清楚的，但是做二维电泳的结果却很不好：点很少，纵条纹很多。用的考马斯亮蓝染色的，操作方法技术都正确，就是找不到原因。求助，求助，求助！！！非常感谢！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
-
透明质酸酶的作用机制：如何实现药物递送
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有173人回复
-
爱思维尔旗下LWT投稿
已经有9人回复
-
替拉扎明为缺氧选择性细胞毒药物研究提供新思路
已经有0人回复
-
拉坦前列腺素(Latanoprost)：前列腺素F2α衍生物如何成为青光眼一线用药
已经有0人回复
-
卟啉家族中的明星分子：MESO-四(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉的性质与制备
已经有1人回复
-
宠物寄生虫防治：氟雷拉纳阻断GABA受体，持效12周驱杀跳蚤蜱虫
已经有0人回复
-
为呼吸打开通道：依伐卡托的科学之旅
已经有1人回复
-
Dordaviprone（ONC201）：小分子药物在中线胶质瘤中的应用
已经有0人回复
-
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 做电泳时蛋白条带出不来？
已经有19人回复
- 求助，SDS-PAGE电泳图（Marker最后一个条带跑不出，胶底部很奇怪）
已经有11人回复
- 为什么SDS-PAGE胶在做胶的时候会出现不均匀的条纹？
已经有17人回复
- 能否用蛋白质SDS-PAGE的条带去做氨基酸序列分析？
已经有6人回复
- sds-page跑胶问题
已经有8人回复
- 求教一个关于SDS-PAGE电泳的问题（电泳条带的重影以及marker最后一条带跑不出来）
已经有5人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳同一蛋白不同loading buffer条带不一样
已经有7人回复
- 就要被蛋白质电泳（SDS-PAGE）灭了，有图有真相，望高手指点
已经有28人回复
- sds-page电泳时marker少跑出一条带是怎么回事？
已经有6人回复
- SDS-PAGE蛋白质电泳，电泳迁移率只与分子量相关吗？
已经有11人回复
- SDS-PAGE超低分子量电泳实验
已经有6人回复
- sds page 跑不出条带
已经有11人回复
- SDS-PAGE电泳下面那条带是怎么回事
已经有10人回复
- SDS-PAGE跑谷蛋白无法浓缩，实验图弥撒的问题
已经有6人回复
- SDS-PAGE电泳求助
已经有13人回复
- SDS-PAGE 我的样品没有跑出条带，请教高手！谢谢！
已经有7人回复
- SDS-PAGE电泳蛋白质变性
已经有7人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-05-15 08:05:39
DBWJ
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 40 (小学生)
- 金币: 1871.9
- 散金: 13
- 红花: 5
- 帖子: 244
- 在线: 107.1小时
- 虫号: 2416640
- 注册: 2013-04-13
- 专业: 微生物生态学
3楼2013-05-15 11:53:56
4楼2013-05-15 14:43:21
5楼2013-05-15 14:47:25
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
憧雪3136楼2013-05-15 23:57:29
7楼2013-05-16 11:56:36
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
憧雪313: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-05-16 16:32:50
憧雪313: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-05-17 22:00:10
憧雪313: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-05-16 16:32:50
憧雪313: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-05-17 22:00:10
|
胶条中残留少量蛋白也是正常的，不过残留太多就不好了。残留蛋白主要是因为变性不充分，蛋白表面没有充分结合SDS，电荷不够，所以电泳时会跑得非常慢。胶条从第一向下来因为表面有油，油会影响变性时溶液浸入胶条。先用镊子夹住胶条在滤纸上尽量吸去油，然后再进行变性处理。如果变性困难的样品，可以适当延长变性时间，实在不行的话，可以增加变性时的平衡缓冲液中SDS的含量。放胶条也有一定技巧，也很难说清楚。一般是先在第二向胶面上放电泳缓冲液，然后把胶条推到胶面尽量接触，然后再吸去多余的缓冲液，再用琼脂糖固定。 |
8楼2013-05-16 12:11:19
9楼2013-05-16 16:32:19
精华III: