[交流] 能否用蛋白质SDS-PAGE的条带去做氨基酸序列分析？

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1楼2012-10-29 08:00:02

5202wangmin

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unfemale: 金币+1, 有用，想继续交流 2012-10-29 17:47:56

得看你跑的是变性电泳还是非变性电泳，非变性电泳可以

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unfemale

2楼2012-10-29 08:39:42

unfemale

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 5202wangmin at 2012-10-29 08:39:42
得看你跑的是变性电泳还是非变性电泳，非变性电泳可以

谢谢！能否详细说一下？

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3楼2012-10-29 17:47:24

hsd3521

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unfemale: 金币+2, 谢谢！Native—PAGE条件能否仔细说明一下？除了体系中不加SDS外，跟SDS-PAGE一样吗？ 2012-10-30 09:08:30

SDS-PAGE 变性电泳不能用来分析了
你跑 native-PAGE 在考马斯亮蓝染色之前用紫外确定条带切割是可以用来氨基酸分析的

4楼2012-10-29 18:52:30

5202wangmin

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unfemale: 金币+2, 多谢 2012-10-30 17:43:41

引用回帖:

3楼: Originally posted by unfemale at 2012-10-29 17:47:24
谢谢！能否详细说一下？...

如果你的样品没有经过苏糖醇或巯基乙醇变性，没有经过煮沸的，蛋白可以回收利用。。。。

5楼2012-10-30 09:51:51

hsd3521

主管区长 (知名作家)

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unfemale: 金币+2, 多谢 2012-10-30 17:45:07

不加SDS 巯基乙醇样品不煮沸电极缓冲液不加SDS

6楼2012-10-30 11:01:14

SPMMP

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unfemale: 金币+1, 多谢！ 2012-10-31 08:11:35

应在SDS-PAGE后通过电转移法转移到PVDF膜上，然后测定序列。详细操作请参考科学出版社的《精编蛋白质科学实验指南》，2007年，pp324-327。

7楼2012-10-31 08:03:00