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色谱柱柱压异常高,尝试了多种办法,请教高人

作者 hsd3521
来源: 小木虫 1150 23 举报帖子
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柱子型号:Jupiter C4 reversed phase column (250 mm × 4.6 mm, 300 -sized pores, 5-μm sized particles)
进样:植物蛋白粗提液,过0.45膜
流动相:70%水30%乙腈,结束试验后用100%乙腈冲洗
问题:用了两三天后,柱压奇高,达到220左右,用100%乙腈冲洗,柱压正常,在45-48之间
采取措施:超声筛板,无用;反相冲洗,无用;低流速5%甲醇冲洗两天后,采用流动相仍在190左右
所以,在此请高人指点,如果操作,为什么100%乙腈冲洗时正常,柱子真得堵了吗?
附件是我在网上搜集的液相色谱柱的清洗与再生方法,感谢大家,在此分享[ Last edited by hsd3521 on 2013-3-26 at 07:53 ]

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  • 精华评论
  • hsd3521

    引用回帖:
    6楼: Originally posted by codyliu at 2013-03-24 15:06:47
    一般已经过了0.45的膜了就不应该是样品堵了柱子,但是如果用这个比例洗脱一直有问题的话可以考虑换一下比例,还有,我认为你检查一下是不是有人用它做过别的,他们是不是有残留,我就遇到过在检测池那里出现残留的问 ...

    谢谢您的回复
    仪器安捷伦1100 到220的时候就容易出现蹦柱头的危险情况了
    检测池应该没什么问题

  • hsd3521

    引用回帖:
    7楼: Originally posted by devsts at 2013-03-24 16:41:21
    柱子倒过来装着冲下试试。

    感谢回复,已倒冲过了,但是正用时问题依旧

  • hsd3521

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by huang19880 at 2013-03-24 11:13:28
    可以一个个模块拆,排除看看是连上哪个模块压力大。如果柱温箱柱子前接口不连接,压力正常,连上柱子(柱后未连未连接检测器)压力就大了这样就是柱子问题了 。

    谢谢,用的时候出现过一次柱压过大,柱子连接头崩开的状况,压力骤降到5,所以基本可以推测是柱子问题了
    并且别人用其他柱子的时候应该没有问题

  • zjp0900

    接了其他色谱柱试过没? 如果其他色谱柱没问题,那么基本可以确定是色谱柱堵住了。

  • yulingzhu

    请问你是反冲是压力正常,而正向使用时压力很高吗?如果是这样的话是入口端的柱筛板堵了,我就遇到过类似的情况。

  • TrickyVick

    我说个最终方法,有点伤柱子:
    用DMSO或DMF洗

  • bwshanxi

    怕是分子量有点大 柱子被堵

  • 416301116

    你可以把样品过一次性滤膜在进样试一试

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