色谱柱柱压异常高,尝试了多种办法,请教高人
柱子型号:Jupiter C4 reversed phase column (250 mm × 4.6 mm, 300 -sized pores, 5-μm sized particles)
进样:植物蛋白粗提液,过0.45膜
流动相:70%水30%乙腈,结束试验后用100%乙腈冲洗
问题:用了两三天后,柱压奇高,达到220左右,用100%乙腈冲洗,柱压正常,在45-48之间
采取措施:超声筛板,无用;反相冲洗,无用;低流速5%甲醇冲洗两天后,采用流动相仍在190左右
所以,在此请高人指点,如果操作,为什么100%乙腈冲洗时正常,柱子真得堵了吗?
附件是我在网上搜集的液相色谱柱的清洗与再生方法,感谢大家,在此分享[ Last edited by hsd3521 on 2013-3-26 at 07:53 ]
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京公网安备 11010802022153号
谢谢您的回复
仪器安捷伦1100 到220的时候就容易出现蹦柱头的危险情况了
检测池应该没什么问题
,
感谢回复,已倒冲过了,但是正用时问题依旧
谢谢,用的时候出现过一次柱压过大,柱子连接头崩开的状况,压力骤降到5,所以基本可以推测是柱子问题了
并且别人用其他柱子的时候应该没有问题
接了其他色谱柱试过没? 如果其他色谱柱没问题,那么基本可以确定是色谱柱堵住了。
请问你是反冲是压力正常,而正向使用时压力很高吗?如果是这样的话是入口端的柱筛板堵了,我就遇到过类似的情况。
我说个最终方法,有点伤柱子:
用DMSO或DMF洗
怕是分子量有点大 柱子被堵
你可以把样品过一次性滤膜在进样试一试