老师，我做的大豆基因的克隆，通过rna反转录cdna然后进行...
老师，我做的大豆基因的克隆，通过rna反转录cdna然后进行扩增，引物是老师设计的，扩增后用凝脂糖琼脂电泳，出来目的条带了，然后我回收错误了，想再次扩增，就再也扩不出来了，这是什么原因呢，我用的是温度梯度退火，别的条件都没有变，求老师解答，谢谢 
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一般是模板的原因
这个基因表达量是不是很低？在不同组织部位的表达量不同
cDNA比较娇贵，可以重新提取表达量高的组织的RNA反转录得到质量更好的cDNA试试，
好的，谢谢老师
回收之前装样的管子还在么？捡回来，加点水，当模板继续Ｐ
cDNA可能降解了 建议用之前的RNA重新反转再扩增