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我的雅戈儿

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR目的条带不亮 已有4人参与

我的目的基因1000多bp,PCR做出来有我的目的条带,除了一条载体的剩余片段的条带以外也没有其他的杂带,但是条带就是不亮,再割胶回收都没有什么了,我把循环数从30提升到35,也提高了退火温度,但是就是不亮,所以来请教一下各位
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-10-15 23:26:08
本帖内容被屏蔽

2楼2015-10-15 11:25:44
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tolobio

新虫 (小有名气)


商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容

小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
质粒构建,现在已经比较成熟了。建议送到公司去做比较方便,质量、速度还有保证,价格也不贵。
http://www.tolobio.com/service_detail.php?id=110
3楼2015-10-15 12:08:14
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我的雅戈儿

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Eternity宇 at 2015-10-15 11:25:44
呃,你可以把模板量增加,引物也相应的增加,做个大体系的再做胶回收。
其实也可以不做胶回收直接清洁的…_

模板我增加到2ul,引物还是各1ul,还是不亮,如果不做胶回收的话酶切怕做不好
4楼2015-10-15 16:16:07
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Aliyo

禁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

5楼2015-10-15 20:02:15
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我的雅戈儿

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Aliyo at 2015-10-15 20:02:15
用第一次pcr的产物作为模版重新进行一次pcr试试

试过了,做出来没有条带,只有引物二聚体
6楼2015-10-16 11:04:11
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hugeneuron

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
模板不用动,引物多一点。你讲微升是没意义的,要看物质的量。

发自小木虫IOS客户端
7楼2015-10-16 11:07:52
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