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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请问为什么PCR产物是两个引物之间的大小？
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

[求助] 请问为什么PCR产物是两个引物之间的大小？ 已有3人参与

请问为什么PCR产物是两个引物之间的大小，若是延伸时间足够长，PCR产物还是引物之间大小吗？
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世界上只有一种真正的英雄主义，那就是看清生活的真相之后，依然热爱生活。
1楼 2015-08-22 21:46:14
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小木虫刘树青: 金币+8, ★★★很有帮助, 谢谢 2015-08-23 12:23:02
看来你对PCR的原理还没有理解透彻。其实PCR产物并不是全部都是引物之间大小，在PCR过程的每个循环中以你加的DNA为模板的扩增产物大小是长于你引物之间大小的，最终PCR产物中这样的片段数目=模板分子数×循环数，而从第二个循环往后开始的每个循环中，以之前循环中合成的片段为模板的的扩增产物大小都是引物之间的大小，最终PCR产物中这样的片段数目=模板分子数×2的（n-1）次方，n为循环数，从这可以看出，PCR过程中，引物之间大小的产物是以指数级增长，而比引物之间大小长的产物是以倍数增加，所以，最后PCR产物中引物之间大小的产物远多于其他序列。你理解的PCR产物中存在比引物之间大小更长的片段是对的，但是你延长时间也只是使这些片段更长，数目并不会增多。
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6楼2015-08-23 01:08:34
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小木虫刘树青: 金币+4, ★★★很有帮助, 谢谢 2015-08-23 12:23:12
本帖内容被屏蔽
5楼2015-08-22 23:23:06
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠
引用回帖:
6楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-23 01:08:34
看来你对PCR的原理还没有理解透彻。其实PCR产物并不是全部都是引物之间大小，在PCR过程的每个循环中以你加的DNA为模板的扩增产物大小是长于你引物之间大小的，最终PCR产物中这样的片段数目=模板分子数×循环数，而从 ...

我明白了。http://v.youku.com/v_show/id_XMjE1MDkwNTMy.html
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世界上只有一种真正的英雄主义，那就是看清生活的真相之后，依然热爱生活。
8楼2015-08-23 12:22:25
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普通回帖

mengzhuan319

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小木虫刘树青: 金币+3, ★有帮助, 没具体回答我的问题，我想知道为什么？ 2015-08-22 22:06:44
产物是引物之间的大小还是两个引物碱基书的总和
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HIV检测试剂盒研发、细胞培养
2楼2015-08-22 21:51:42
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠
引用回帖:
2楼: Originally posted by mengzhuan319 at 2015-08-22 21:51:42
产物是引物之间的大小还是两个引物碱基书的总和

可是若是延伸时间足够长，那每一条引物可以向各自的3‘端无线延伸，是不是可以理解为3’端超出的单链自己就解聚了
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世界上只有一种真正的英雄主义，那就是看清生活的真相之后，依然热爱生活。
3楼2015-08-22 21:57:11
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠
引用回帖:
2楼: Originally posted by mengzhuan319 at 2015-08-22 21:51:42
产物是引物之间的大小还是两个引物碱基书的总和

我说的是PCR过程中扩增后没有互补的部分最后是怎样的？
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世界上只有一种真正的英雄主义，那就是看清生活的真相之后，依然热爱生活。
4楼2015-08-22 22:01:00
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠
引用回帖:
6楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-23 01:08:34
看来你对PCR的原理还没有理解透彻。其实PCR产物并不是全部都是引物之间大小，在PCR过程的每个循环中以你加的DNA为模板的扩增产物大小是长于你引物之间大小的，最终PCR产物中这样的片段数目=模板分子数×循环数，而从 ...

”从第二个循环往后开始的每个循环中，以之前循环中合成的片段为模板的的扩增产物大小都是引物之间的大小“，“之前循环中合成的片段为模板”这句中的模板是指的“加的DNA为模板的扩增产物”吧？
我们定义：“加的DNA为模板的扩增产物”命名为A
               “以A为模板的扩增产物”命名为B
               A长于引物间大小，那么以A为模板扩增得到的B为啥大小就是引物之间大小了呢？
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世界上只有一种真正的英雄主义，那就是看清生活的真相之后，依然热爱生活。
7楼2015-08-23 12:10:59
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小木虫刘树青 at 2015-08-23 12:22:25
我明白了。http://v.youku.com/v_show/id_XMjE1MDkwNTMy.html...

9楼2015-08-23 12:38:27
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天秤座的女孩

铜虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by 小木虫刘树青 at 2015-08-22 21:57:11
可是若是延伸时间足够长，那每一条引物可以向各自的3‘端无线延伸，是不是可以理解为3’端超出的单链自己就解聚了...

引物是在DNA聚合酶的作用下，以母链为模板，按碱基互补进行延伸子链的，而此种酶的延伸也不是随延伸时间的加长就可以无限延长的。它有一定的出错率，也有延伸片段大小的限制。
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10楼2015-08-23 15:20:52
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