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ciceyh

新虫 (初入文坛)

[求助] 硫氧化菌pcr条带问题 已有2人参与

我最近用无机培养基(硫代硫酸钠为主)分离出2株硫氧化菌,做了pcr鉴定(94度变性,62度退火,72度延伸,33个循环,引物是通用引物品)。做了好多次,大多都跑不出来,其中有几次条带有,但是很暗。昨天做了一次,条带非常亮,很好,但是用那个pcr产物跑第二次确没有条带了,请问各位这有可能什么原因?
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先,你确定第二次胶没有漏么,降解的可能性很小啊。
其次,你反复冻融了么。
最后,第二次上样不会是没溶解完全就上样了吧?
2楼2014-03-12 12:45:55
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shellyxss

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

通用引物的退货温度不是56摄氏度嘛
Always be curious about nature
3楼2014-03-17 09:42:37
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ciceyh

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by shellyxss at 2014-03-17 09:42:37
通用引物的退货温度不是56摄氏度嘛

谢谢,我试试去
4楼2014-03-19 15:11:43
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bonbonzd

木虫 (小有名气)

楼主,你好,你有没有关于硫氧化相关功能基因的信息,比如基因名称,序列,引物等,谢谢!
5楼2014-04-19 22:37:03
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