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ciceyh

新虫 (初入文坛)

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[求助] 硫氧化菌pcr条带问题已有2人参与

我最近用无机培养基（硫代硫酸钠为主）分离出2株硫氧化菌，做了pcr鉴定（94度变性，62度退火，72度延伸，33个循环，引物是通用引物品）。做了好多次，大多都跑不出来，其中有几次条带有，但是很暗。昨天做了一次，条带非常亮，很好，但是用那个pcr产物跑第二次确没有条带了，请问各位这有可能什么原因？

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1楼 2014-03-12 12:15:48

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dllchina

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有机的微生物大神

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

首先，你确定第二次胶没有漏么，降解的可能性很小啊。
其次，你反复冻融了么。
最后，第二次上样不会是没溶解完全就上样了吧？

2楼2014-03-12 12:45:55

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shellyxss

金虫 (正式写手)

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专业: 微生物资源与分类学

【答案】应助回帖

通用引物的退货温度不是56摄氏度嘛

Always be curious about nature

3楼2014-03-17 09:42:37

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ciceyh

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by shellyxss at 2014-03-17 09:42:37
通用引物的退货温度不是56摄氏度嘛

谢谢，我试试去

4楼2014-03-19 15:11:43

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bonbonzd

木虫 (小有名气)

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楼主，你好，你有没有关于硫氧化相关功能基因的信息，比如基因名称，序列，引物等，谢谢！

5楼2014-04-19 22:37:03

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