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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » mi159a 扩增产物的大小怎么确定？
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Lopick

新虫 (初入文坛)

[求助] mi159a 扩增产物的大小怎么确定？ 已有2人参与

各位大神：
    我要扩增mir159a：UUUGGAUUGAAGGGAGCUCUU
设计了茎环引物：GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGAC TAGAGCTC
特异上游引物：CTGGAG TTTGGATTGAAGGGAG
通用下游引物：GTGCAGGGTCCGAGGT
  那我扩增后产物的大小是多少？怎么确定呢？ 跪求各位指点迷津！！！！！！！！！！！！
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1楼 2015-07-13 11:26:10
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micro_lsp

捐助贵宾 (职业作家)

小小虫

【答案】应助回帖

有办法的。你可以跑胶检测，如果用琼脂糖胶，浓度高一点，如2-3%。这种小片段最好用尿素-PAGE检测，另外也可以用Northern杂交检测。
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Nothing is all.
2楼2015-08-07 08:08:45
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micro_lsp

捐助贵宾 (职业作家)

小小虫

【答案】应助回帖

根据我的经验, 你可以用不同方法或都用:
1. 电泳检测: 2-3%的琼脂糖胶, 或10-15%的U-PAGE胶
2. Northern杂交: 也是很好的办法
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Nothing is all.
3楼2015-08-07 08:15:56
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漏气的高压锅

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我现在也被楼主遇到的问题所困惑。产物的大小可以通过序列分析获得，不是电泳和杂交，但是到底怎么分析？
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4楼2016-03-22 14:35:08
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