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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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于德斌

金虫 (正式写手)

[交流] 289KD大小蛋白的WB结果分析,求各位帮我分析一下是什么原因 已有4人参与

我做的是mtor蛋白的WB,分子量是289。大家帮我分析一下为什么会出现这样的结果。我是4度湿转过夜的。红色箭头位置应该是目的蛋白位置

289KD大小蛋白的WB结果分析,求各位帮我分析一下是什么原因
mtor.png


289KD大小蛋白的WB结果分析,求各位帮我分析一下是什么原因-1
QQ图片20150711110427.jpg
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知识就是力量
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电泳没做好啊    转膜封闭也有问题
以前做 laminb ,8%浓度分离胶电泳   220v冰中转膜  慢慢找条件试试看
2楼2015-07-11 15:54:49
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HTweiyi

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这肯定是没做好操作,你确定下需要的胶的浓度是多少,你的蛋白比较大,看需要什么样的浓缩胶和分离胶
还有就是看电泳液的配方是不是有问题,电泳时你的电压是不是很大,可以不要太高
转膜时在冰水里面试试,过夜的话,会不会时间太长了,
WB实验的,很多操作的条件都是需要慢慢摸索的,祝你好运
3楼2015-07-15 10:05:24
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zwwsoul

铜虫 (小有名气)

爱莫能助啊 师弟

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2015-11-17 16:17:07
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于德斌

金虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by zwwsoul at 2015-11-17 16:17:07
爱莫能助啊 师弟

师姐,这个问题我已经解决啦

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

知识就是力量
5楼2015-11-17 18:06:37
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邻家小妹

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 于德斌 at 2015-11-17 18:06:37
师姐,这个问题我已经解决啦...

你做大分子很有经验么
6楼2016-05-27 11:54:42
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邻家小妹

新虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 于德斌 at 2015-11-17 18:06:37
师姐,这个问题我已经解决啦...

你做大分子很有经验么
7楼2016-05-27 11:55:18
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于德斌

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 邻家小妹 at 2016-05-27 11:54:42
你做大分子很有经验么...

就做过一次大分子的WB,之前没做出来,我又订了另一个公司的抗体,然后就做出来了。条件跟之前做的都一样。
我个人认为WB做不出来很大程度上取决于抗体
知识就是力量
8楼2016-05-27 13:29:53
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邻家小妹

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 于德斌 at 2016-05-27 13:29:53
就做过一次大分子的WB,之前没做出来,我又订了另一个公司的抗体,然后就做出来了。条件跟之前做的都一样。
我个人认为WB做不出来很大程度上取决于抗体...

我们那个应该不是这个原因,我们的单体是可以做出来的,但是四聚体这种大分子量蛋白我们是非常没有经验 根本拿不到很清晰的条带
9楼2016-05-28 20:34:20
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