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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 请问，WB转膜后用考染的原因或者目的是什么？
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

[求助] 请问，WB转膜后用考染的原因或者目的是什么？ 已有2人参与

请问，WB转膜后用考染的原因或者目的是什么？
请问，WB转膜后用考染的原因或者目的是什么？
2014-03-06_213554.jpg
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青山不断，绿水长流
1楼 2014-03-06 21:33:14
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youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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HYZ221314: 金币+5 2014-03-08 17:05:13
确认转膜效率，以防转膜不成功
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天行健
2楼2014-03-06 22:31:36
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yyshpy007

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
3楼2014-03-07 03:04:49
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

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2楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-03-06 22:31:36
确认转膜效率，以防转膜不成功

效率？是不是看考染后条带的大小或者明亮程度来区别？若不好，就不会接着往下做

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青山不断，绿水长流
4楼2014-03-07 07:48:07
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youlinglyw

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一匡天下

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4楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-03-07 07:48:07
效率？是不是看考染后条带的大小或者明亮程度来区别？若不好，就不会接着往下做
...

嗯，是的，如果你发现你根本没转成功，那就没必要做wb了，毕竟wb的一抗二抗都很贵，而且做起来得好几个小时。

当然，也有一种作用，就是你上样量很大，转膜用不完，还有不少留在原来胶上，做个考染可以用来跟wb对比，很多文章审稿人要求一个wb图需要附一张sds-page
但是大部分人都是同时做两块胶，一块考染，一块wb。很少出现我说的第二种情况
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天行健
5楼2014-03-07 09:30:48
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

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5楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-03-07 09:30:48
嗯，是的，如果你发现你根本没转成功，那就没必要做wb了，毕竟wb的一抗二抗都很贵，而且做起来得好几个小时。

当然，也有一种作用，就是你上样量很大，转膜用不完，还有不少留在原来胶上，做个考染可以用来跟wb ...

我貌似弄混了。WB跑胶结束就是转膜，还是膜用丽春红，胶用考马斯亮蓝，是这样的吗？而不是膜用考马斯亮蓝染色？还有的图片，你能给我看看，是WB的结果还是SDS-PAGE的结果？
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青山不断，绿水长流
6楼2014-03-07 14:45:18
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youlinglyw

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一匡天下

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6楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-03-07 14:45:18
我貌似弄混了。WB跑胶结束就是转膜，还是膜用丽春红，胶用考马斯亮蓝，是这样的吗？而不是膜用考马斯亮蓝染色？还有的图片，你能给我看看，是WB的结果还是SDS-PAGE的结果？...

是的，wb跑胶结束，转膜，然后一抗孵育，二抗孵育。 胶用考染。
膜当然不能用考染了。 你可以发个图
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天行健
7楼2014-03-07 15:03:32
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youlinglyw

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一匡天下

优秀版主
你发的图是上面是wb，但下面我不太懂，albumin是白蛋白，但是为什么会出现彩色呢？难道意思是证明上样量？

但是上样量一般会用内参给出对比的
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天行健
8楼2014-03-07 15:07:54
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主
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8楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-03-07 15:07:54
你发的图是上面是wb，但下面我不太懂，albumin是白蛋白，但是为什么会出现彩色呢？难道意思是证明上样量？

但是上样量一般会用内参给出对比的

这是一篇Cell report上的文章，图片只是说考染，因为蛋白样品来自血清，所以白蛋白就是内参
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青山不断，绿水长流
9楼2014-03-07 15:21:10
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gongyufeng87

银虫 (小有名气)
2楼正解
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时间仍在，我们在飞逝
10楼2014-03-07 22:30:37
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