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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

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[求助] 请问,WB转膜后用考染的原因或者目的是什么? 已有2人参与

请问,WB转膜后用考染的原因或者目的是什么?
请问,WB转膜后用考染的原因或者目的是什么?
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youlinglyw

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一匡天下

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
HYZ221314: 金币+5 2014-03-08 17:05:13
确认转膜效率,以防转膜不成功
天行健
2楼2014-03-06 22:31:36
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yyshpy007

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
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3楼2014-03-07 03:04:49
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

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引用回帖:
2楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-03-06 22:31:36
确认转膜效率,以防转膜不成功

效率?是不是看考染后条带的大小或者明亮程度来区别?若不好,就不会接着往下做

[ 发自小木虫客户端 ]
青山不断,绿水长流
4楼2014-03-07 07:48:07
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youlinglyw

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一匡天下

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引用回帖:
4楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-03-07 07:48:07
效率?是不是看考染后条带的大小或者明亮程度来区别?若不好,就不会接着往下做
...

嗯,是的,如果你发现你根本没转成功,那就没必要做wb了,毕竟wb的一抗二抗都很贵,而且做起来得好几个小时。

当然,也有一种作用,就是你上样量很大,转膜用不完,还有不少留在原来胶上,做个考染可以用来跟wb对比,很多文章审稿人要求一个wb图需要附一张sds-page
但是大部分人都是同时做两块胶,一块考染,一块wb。很少出现我说的第二种情况
天行健
5楼2014-03-07 09:30:48
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

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引用回帖:
5楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-03-07 09:30:48
嗯,是的,如果你发现你根本没转成功,那就没必要做wb了,毕竟wb的一抗二抗都很贵,而且做起来得好几个小时。

当然,也有一种作用,就是你上样量很大,转膜用不完,还有不少留在原来胶上,做个考染可以用来跟wb ...

我貌似弄混了。WB跑胶结束就是转膜,还是膜用丽春红,胶用考马斯亮蓝,是这样的吗?而不是膜用考马斯亮蓝染色?还有的图片,你能给我看看,是WB的结果还是SDS-PAGE的结果?
青山不断,绿水长流
6楼2014-03-07 14:45:18
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youlinglyw

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一匡天下

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引用回帖:
6楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-03-07 14:45:18
我貌似弄混了。WB跑胶结束就是转膜,还是膜用丽春红,胶用考马斯亮蓝,是这样的吗?而不是膜用考马斯亮蓝染色?还有的图片,你能给我看看,是WB的结果还是SDS-PAGE的结果?...

是的,wb跑胶结束,转膜,然后一抗孵育,二抗孵育。 胶用考染。
膜当然不能用考染了。 你可以发个图
天行健
7楼2014-03-07 15:03:32
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youlinglyw

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一匡天下

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你发的图是上面是wb,但下面我不太懂,albumin是白蛋白,但是为什么会出现彩色呢?难道意思是证明上样量?

但是上样量一般会用内参给出对比的
天行健
8楼2014-03-07 15:07:54
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

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引用回帖:
8楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-03-07 15:07:54
你发的图是上面是wb,但下面我不太懂,albumin是白蛋白,但是为什么会出现彩色呢?难道意思是证明上样量?

但是上样量一般会用内参给出对比的

这是一篇Cell report上的文章,图片只是说考染,因为蛋白样品来自血清,所以白蛋白就是内参
青山不断,绿水长流
9楼2014-03-07 15:21:10
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gongyufeng87

银虫 (小有名气)

2楼正解
时间仍在,我们在飞逝
10楼2014-03-07 22:30:37
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