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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 保存的菌种可以直接摇菌提质粒吗
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cherry--

金虫 (小有名气)

[求助] 保存的菌种可以直接摇菌提质粒吗已有9人参与

-20保存的菌种（18t载构建的克隆菌）可以直接取10微升到1000LB液体培养基中摇菌提取质粒吗？还是得复摇一下再提？每次提质粒的浓度都不高不知道什么原因。
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1楼2015-07-09 13:42:06
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cherry--

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by erland21411 at 2015-07-09 21:24:14
直接摇提质粒可以的。
质粒浓度和你的菌的浓度以及你集菌的多少有关。如果你是用试剂盒提的话，还和你最后一步洗脱液的多少有关系，当然和你用的试剂盒的效率也有关。

1ml菌液每次测OD值都不高，0.1~0.2左右，我就怀疑菌有问题，我们用宝生物的质粒小提每次4ml菌液来提质粒，提后用50洗脱，浓度都不高。
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6楼2015-07-10 08:56:23
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cherry--: 金币+2, ★有帮助, 可是质粒浓度不高 2015-07-09 17:07:48
保存的菌种可以直接摇菌提质粒的，放心吧。
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2楼2015-07-09 16:37:57
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jiqinger

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最好先要激活一下，然后再大规模摇菌。
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123456
3楼2015-07-09 17:18:37
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erland21411

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cherry--: 金币+2, ★有帮助 2015-07-10 08:54:38
直接摇提质粒可以的。
质粒浓度和你的菌的浓度以及你集菌的多少有关。如果你是用试剂盒提的话，还和你最后一步洗脱液的多少有关系，当然和你用的试剂盒的效率也有关。
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4楼2015-07-09 21:24:14
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