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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 酵母诱导表达相关问题？
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小橘子2013

新虫 (小有名气)

[求助] 酵母诱导表达相关问题？

本人新手，在做毕赤酵母诱导表达。现在有:三个个问题：
1：对照的设置。我没有做空质粒的电转，所以对照设置的是空菌的诱导，未诱导，目的菌的诱导，未诱导。四个同时做，不知道这样做是否有对照性？
2：在BMGY培养基里摇到OD600=3，换到BMMY诱导培养的问题。对于BMMY培养基，按照正常的配置，除了甲醇其余的都加好，用它来调OD600=1后，再加甲醇，是按照整个配置体积来算1%还是调完OD值后按实际体积加1%。
例如，200ml的BMMY培养基，除了甲醇外的体积是180.4ml，调完OD值后大约也是180ml。我想用100%甲醇往里加，应该加2ml？还是1.8ml？
3：这次实验中我用的2ml甲醇，对于上边的四个样品，未诱导的样我还是按长长配方加了20ml 10x甘油 ，诱导的样品加2ml甲醇。一天后发现未诱导的长的很浓，而诱导的长的一般，这是什么原因呢？
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简简单单才是真
1楼 2015-07-05 09:54:13
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我是小披风

新虫 (初入文坛)
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-07-15 13:55:39
毕赤酵母表达常用载体与14种培养基配方大全
http://elabbuy.cn/forum.php?mod=viewthread&tid=247&fromuid=27
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2楼2015-07-15 08:05:38
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小橘子2013

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 我是小披风 at 2015-07-15 08:05:38
毕赤酵母表达常用载体与14种培养基配方大全
http://elabbuy.cn/forum.php?mod=viewthread&tid=247&fromuid=27

谢谢！
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简简单单才是真
3楼2015-07-15 10:23:32
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