24小时热门版块排行榜    

查看: 2099  |  回复: 15

bw2318

木虫 (小有名气)

[交流] 有测过蛋白质水解度的吗? 有点问题 求指教.

如题,我用过甲醛滴定法和茚三酮比色法两种方法测蛋白质水解度,但遇到些问题,不知道各位有没有跟我一样的困惑,如知道的 请给点建议好吗?
甲醛滴定法:
(1)40%中性甲醛配置:以百里酚酞做指示剂,用氢氧化钠溶液将40%甲醛中和至淡蓝色(食品分析,张永华,王永华)
  问题:中性甲醛滴定到淡蓝色 用的氢氧化钠浓度问题,0.01和1mol/l我都用过,0.01mol/L滴定时达不到淡蓝色要求(需要量很大),1mol/L能滴定至淡蓝色,但对最后样品滴定是影响很大,没滴定就成深蓝色了。

茚三酮比色法:
(1)标准曲线问题:按方法做后发现颜色太深 测不出吸光值。
(2)样品稀释问题:液体样品一般如何预处理后进行测定,避免色泽太深无法测。

具体方法如图:

有测过蛋白质水解度的吗?  有点问题 求指教.
IMG_20150624_111827.jpg


有测过蛋白质水解度的吗?  有点问题 求指教.-1
IMG_20150624_111849.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bw2318

木虫 (小有名气)

第一个甲醛滴定,第二个图是茚三酮比色法
2楼2015-06-24 11:23:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

亲亲鸡腿

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我做过茚三酮比色法的,但我的标准品颜色梯度挺明显,你用的是什么氨基酸?浓度会不会太高?我最大才200.
努力成为正能量的小太阳
3楼2015-06-24 17:54:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 亲亲鸡腿 at 2015-06-24 17:54:50
我做过茚三酮比色法的,但我的标准品颜色梯度挺明显,你用的是什么氨基酸?浓度会不会太高?我最大才200.

标品是谷氨酸,配成200ug/mL标准溶液。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-06-24 18:50:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

亲亲鸡腿

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
bw2318: 金币+2 2015-06-29 11:30:12
引用回帖:
4楼: Originally posted by bw2318 at 2015-06-24 18:50:35
标品是谷氨酸,配成200ug/mL标准溶液。
...

哦,我用的是甘氨酸,但是你那步骤上为什么没加抗坏血酸呢?
我说的是你配成梯度时的浓度感觉比我的高。如果只是单纯的浓度高可以再稀释后测,如果是步骤有问题你还要逐一排查了,good luck!
努力成为正能量的小太阳
5楼2015-06-25 07:15:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huhyyong

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你可以取1-5ml水解液,溶于20ml水中再用甲醛或者茚三酮测定,在线监测的话pH-State法不错,还能维持水解液的pH值
6楼2015-06-29 10:39:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by huhyyong at 2015-06-29 10:39:36
你可以取1-5ml水解液,溶于20ml水中再用甲醛或者茚三酮测定,在线监测的话pH-State法不错,还能维持水解液的pH值

谢谢你的回复,主要问题就是甲醛滴定法和电位滴定法都用到中性甲醛,你是如何配置的?

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-06-29 10:45:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huhyyong

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by bw2318 at 2015-06-29 10:45:43
谢谢你的回复,主要问题就是甲醛滴定法和电位滴定法都用到中性甲醛,你是如何配置的?
...

我基本就用低浓度NaOH条件pH值到6.82
8楼2015-06-29 10:49:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huhyyong

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by huhyyong at 2015-06-29 10:49:04
我基本就用低浓度NaOH条件pH值到6.82...

滴定的时候也滴定到这个值,好像是8.2,
9楼2015-06-29 10:52:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by huhyyong at 2015-06-29 10:52:48
滴定的时候也滴定到这个值,好像是8.2,...

配中性甲醛时,用指示剂了吗?用ph计调节到8.2,有2个浓度氢氧化钠,0.05,0.1。你用的是哪种?

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2015-06-29 11:00:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bw2318 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 268求调剂 +3 简单点0 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:15 by wangjihu
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿,福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 环境工程调剂 +6 大可digkids 2026-03-16 6/300 2026-03-16 17:16 by barlinike
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +5 Liwangman 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:10 by 我的船我的海
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧, 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生,2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
信息提示
请填处理意见