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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 有测过蛋白质水解度的吗？ 有点问题 求指教.
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bw2318

木虫 (小有名气)

[交流] 有测过蛋白质水解度的吗？ 有点问题 求指教.

如题，我用过甲醛滴定法和茚三酮比色法两种方法测蛋白质水解度，但遇到些问题，不知道各位有没有跟我一样的困惑，如知道的 请给点建议好吗？
甲醛滴定法：
（1）40%中性甲醛配置：以百里酚酞做指示剂，用氢氧化钠溶液将40%甲醛中和至淡蓝色（食品分析，张永华，王永华）
  问题：中性甲醛滴定到淡蓝色 用的氢氧化钠浓度问题，0.01和1mol/l我都用过，0.01mol/L滴定时达不到淡蓝色要求（需要量很大），1mol/L能滴定至淡蓝色，但对最后样品滴定是影响很大，没滴定就成深蓝色了。

茚三酮比色法：
（1）标准曲线问题：按方法做后发现颜色太深 测不出吸光值。
（2）样品稀释问题：液体样品一般如何预处理后进行测定，避免色泽太深无法测。

具体方法如图：

有测过蛋白质水解度的吗？  有点问题 求指教.
IMG_20150624_111827.jpg


有测过蛋白质水解度的吗？  有点问题 求指教.-1
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1楼2015-06-24 11:22:22
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bw2318

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 亲亲鸡腿 at 2015-06-24 17:54:50
我做过茚三酮比色法的，但我的标准品颜色梯度挺明显，你用的是什么氨基酸？浓度会不会太高？我最大才200.

标品是谷氨酸，配成200ug/mL标准溶液。

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2015-06-24 18:50:35
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bw2318

木虫 (小有名气)
第一个甲醛滴定，第二个图是茚三酮比色法
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2楼2015-06-24 11:23:06
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亲亲鸡腿

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我做过茚三酮比色法的，但我的标准品颜色梯度挺明显，你用的是什么氨基酸？浓度会不会太高？我最大才200.
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努力成为正能量的小太阳
3楼2015-06-24 17:54:50
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亲亲鸡腿

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
bw2318: 金币+2 2015-06-29 11:30:12
引用回帖:
4楼: Originally posted by bw2318 at 2015-06-24 18:50:35
标品是谷氨酸，配成200ug/mL标准溶液。
...

哦，我用的是甘氨酸，但是你那步骤上为什么没加抗坏血酸呢？
我说的是你配成梯度时的浓度感觉比我的高。如果只是单纯的浓度高可以再稀释后测，如果是步骤有问题你还要逐一排查了，good luck！
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努力成为正能量的小太阳
5楼2015-06-25 07:15:07
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