24小时热门版块排行榜    

查看: 2427  |  回复: 15

bw2318

木虫 (小有名气)

[交流] 有测过蛋白质水解度的吗? 有点问题 求指教.

如题,我用过甲醛滴定法和茚三酮比色法两种方法测蛋白质水解度,但遇到些问题,不知道各位有没有跟我一样的困惑,如知道的 请给点建议好吗?
甲醛滴定法:
(1)40%中性甲醛配置:以百里酚酞做指示剂,用氢氧化钠溶液将40%甲醛中和至淡蓝色(食品分析,张永华,王永华)
  问题:中性甲醛滴定到淡蓝色 用的氢氧化钠浓度问题,0.01和1mol/l我都用过,0.01mol/L滴定时达不到淡蓝色要求(需要量很大),1mol/L能滴定至淡蓝色,但对最后样品滴定是影响很大,没滴定就成深蓝色了。

茚三酮比色法:
(1)标准曲线问题:按方法做后发现颜色太深 测不出吸光值。
(2)样品稀释问题:液体样品一般如何预处理后进行测定,避免色泽太深无法测。

具体方法如图:

有测过蛋白质水解度的吗?  有点问题 求指教.
IMG_20150624_111827.jpg


有测过蛋白质水解度的吗?  有点问题 求指教.-1
IMG_20150624_111849.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bw2318

木虫 (小有名气)

第一个甲醛滴定,第二个图是茚三酮比色法
2楼2015-06-24 11:23:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

亲亲鸡腿

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我做过茚三酮比色法的,但我的标准品颜色梯度挺明显,你用的是什么氨基酸?浓度会不会太高?我最大才200.
努力成为正能量的小太阳
3楼2015-06-24 17:54:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 亲亲鸡腿 at 2015-06-24 17:54:50
我做过茚三酮比色法的,但我的标准品颜色梯度挺明显,你用的是什么氨基酸?浓度会不会太高?我最大才200.

标品是谷氨酸,配成200ug/mL标准溶液。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-06-24 18:50:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

亲亲鸡腿

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
bw2318: 金币+2 2015-06-29 11:30:12
引用回帖:
4楼: Originally posted by bw2318 at 2015-06-24 18:50:35
标品是谷氨酸,配成200ug/mL标准溶液。
...

哦,我用的是甘氨酸,但是你那步骤上为什么没加抗坏血酸呢?
我说的是你配成梯度时的浓度感觉比我的高。如果只是单纯的浓度高可以再稀释后测,如果是步骤有问题你还要逐一排查了,good luck!
努力成为正能量的小太阳
5楼2015-06-25 07:15:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huhyyong

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你可以取1-5ml水解液,溶于20ml水中再用甲醛或者茚三酮测定,在线监测的话pH-State法不错,还能维持水解液的pH值
6楼2015-06-29 10:39:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by huhyyong at 2015-06-29 10:39:36
你可以取1-5ml水解液,溶于20ml水中再用甲醛或者茚三酮测定,在线监测的话pH-State法不错,还能维持水解液的pH值

谢谢你的回复,主要问题就是甲醛滴定法和电位滴定法都用到中性甲醛,你是如何配置的?

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-06-29 10:45:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huhyyong

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by bw2318 at 2015-06-29 10:45:43
谢谢你的回复,主要问题就是甲醛滴定法和电位滴定法都用到中性甲醛,你是如何配置的?
...

我基本就用低浓度NaOH条件pH值到6.82
8楼2015-06-29 10:49:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huhyyong

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by huhyyong at 2015-06-29 10:49:04
我基本就用低浓度NaOH条件pH值到6.82...

滴定的时候也滴定到这个值,好像是8.2,
9楼2015-06-29 10:52:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by huhyyong at 2015-06-29 10:52:48
滴定的时候也滴定到这个值,好像是8.2,...

配中性甲醛时,用指示剂了吗?用ph计调节到8.2,有2个浓度氢氧化钠,0.05,0.1。你用的是哪种?

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2015-06-29 11:00:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bw2318 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 7/350 2026-08-15 09:09 by 4wMiSEwB6436
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 02:21 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:28 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见