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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 甲醛滴定法测胰蛋白酶水解脱脂乳的水解度
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softcheese

新虫 (初入文坛)

[求助] 甲醛滴定法测胰蛋白酶水解脱脂乳的水解度 已有1人参与

小女子紧急求助，各位大神，有谁用甲醛滴定法测过牛乳的水解度，是先把甲醛调节PH到8.2再加入到已经调节到8.2的水解物中，反应3分钟再滴定到9.2，记录加入甲醛后消耗碱的体积吗？大家的空白试验都是怎么做的呀？真的很着急，谢谢各位亲了！
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不安分的猪2

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1楼 2014-01-02 18:13:26
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taipin345

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
softcheese: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-01-05 11:02:11
空白的话一般用的是相同浓度的底物溶液做的。你的这个话就是用反应浓度的牛乳做就行了，记得体积是一样的
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2楼2014-01-03 12:32:21
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softcheese

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by taipin345 at 2014-01-03 12:32:21
空白的话一般用的是相同浓度的底物溶液做的。你的这个话就是用反应浓度的牛乳做就行了，记得体积是一样的

亲，如果加入中性甲醛就应该是用未水解牛乳做空白，然后将牛乳调套8.2，加入中性甲醛，再记录加入甲醛后滴定到9.2的PH吧？我看有的人还用水做空白，直接加入甲醛（不是中性），所以有点蒙。弱弱的问一下，中性甲醛是把甲醛的PH调到8.2吗？
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3楼2014-01-05 11:01:36
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softcheese

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by taipin345 at 2014-01-03 12:32:21
空白的话一般用的是相同浓度的底物溶液做的。你的这个话就是用反应浓度的牛乳做就行了，记得体积是一样的

一直弄不明白这个，终于找到一个回复我的好人了，希望能帮帮我，先谢谢啦~
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4楼2014-01-05 11:03:26
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taipin345

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

嗯，很多文献不是说了要用中性甲醛啊，是用的酚酞指示剂调的，我是直接用pH计调到8.2的，至于为什么要调到这里，是因为甲醛氧化了会有甲酸的，会让你的滴定值偏大。
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5楼2014-01-05 20:17:26
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softcheese

新虫 (初入文坛)
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5楼: Originally posted by taipin345 at 2014-01-05 20:17:26
嗯，很多文献不是说了要用中性甲醛啊，是用的酚酞指示剂调的，我是直接用pH计调到8.2的，至于为什么要调到这里，是因为甲醛氧化了会有甲酸的，会让你的滴定值偏大。

那你用的甲醛是每加一个样品调10ml还是一批一起调？我发现甲醛调完PH特别不稳定，几分钟ph就变化了，呵呵 对了 还问一下，你使用甲醛有什么防护措施吗？是在通风橱里面还是带了防毒面具或者眼睛什么的吗？感觉甲醛很刺激眼睛，请教亲一下
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6楼2014-01-06 09:52:30
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taipin345

铜虫 (小有名气)
嗯，我一般是一次性调很多甲醛用，我后来就没有测过了，防护的话就是带一个口罩吧，感觉效果不是很好，有条件的话还是在通风厨吧，这东西挺刺激的，感觉不好，你用的甲醛公式是什么啊？？交流一下哈~
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7楼2014-01-06 11:50:49
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softcheese

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by taipin345 at 2014-01-06 11:50:49
嗯，我一般是一次性调很多甲醛用，我后来就没有测过了，防护的话就是带一个口罩吧，感觉效果不是很好，有条件的话还是在通风厨吧，这东西挺刺激的，感觉不好，你用的甲醛公式是什么啊？？交流一下哈~

呵呵  我用的是（M*（V1-V2）*1000）/（6.38*N*V*htot)  最后在成个100%  V1样品消耗碱，V2是未水解样品消耗碱，V是取的水解物的体积，你也是用胰蛋白酶水解吗？我测加入不容量的酶水解度差别不大 而且都非常低 愁人 你做的怎么样？
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8楼2014-01-07 16:04:19
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taipin345

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by softcheese at 2014-01-07 16:04:19
呵呵  我用的是（M*（V1-V2）*1000）/（6.38*N*V*htot)  最后在成个100%  V1样品消耗碱，V2是未水解样品消耗碱，V是取的水解物的体积，你也是用胰蛋白酶水解吗？我测加入不容量的酶水解度差别不大 而且都非常低 愁 ...

嗯，怎么说呢，胰蛋白酶毕竟是专一性很强的酶，只水解赖氨酸和精氨酸，所以一般水解度都很低的，我的差别也不大，一般也就是在10左右徘徊，呵呵~~你把别的条件换换试试，比如温度什么的
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9楼2014-01-07 17:52:50
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taipin345

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by softcheese at 2014-01-07 16:04:19
呵呵  我用的是（M*（V1-V2）*1000）/（6.38*N*V*htot)  最后在成个100%  V1样品消耗碱，V2是未水解样品消耗碱，V是取的水解物的体积，你也是用胰蛋白酶水解吗？我测加入不容量的酶水解度差别不大 而且都非常低 愁 ...

你能再解释一下你公式里面的字母的含义不？还有采用的单位。，，我怎么用你的这个公式算的水解度好大啊0 0
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10楼2014-01-07 17:57:41
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