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softcheese

新虫 (初入文坛)

[求助] 甲醛滴定法测胰蛋白酶水解脱脂乳的水解度 已有1人参与

小女子紧急求助,各位大神,有谁用甲醛滴定法测过牛乳的水解度,是先把甲醛调节PH到8.2再加入到已经调节到8.2的水解物中,反应3分钟再滴定到9.2,记录加入甲醛后消耗碱的体积吗?大家的空白试验都是怎么做的呀?真的很着急,谢谢各位亲了!
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taipin345

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
softcheese: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-01-05 11:02:11
空白的话一般用的是相同浓度的底物溶液做的。你的这个话就是用反应浓度的牛乳做就行了,记得体积是一样的
2楼2014-01-03 12:32:21
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softcheese

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by taipin345 at 2014-01-03 12:32:21
空白的话一般用的是相同浓度的底物溶液做的。你的这个话就是用反应浓度的牛乳做就行了,记得体积是一样的

亲,如果加入中性甲醛就应该是用未水解牛乳做空白,然后将牛乳调套8.2,加入中性甲醛,再记录加入甲醛后滴定到9.2的PH吧?我看有的人还用水做空白,直接加入甲醛(不是中性),所以有点蒙。弱弱的问一下,中性甲醛是把甲醛的PH调到8.2吗?
3楼2014-01-05 11:01:36
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softcheese

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by taipin345 at 2014-01-03 12:32:21
空白的话一般用的是相同浓度的底物溶液做的。你的这个话就是用反应浓度的牛乳做就行了,记得体积是一样的

一直弄不明白这个,终于找到一个回复我的好人了,希望能帮帮我,先谢谢啦~
4楼2014-01-05 11:03:26
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taipin345

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

嗯,很多文献不是说了要用中性甲醛啊,是用的酚酞指示剂调的,我是直接用pH计调到8.2的,至于为什么要调到这里,是因为甲醛氧化了会有甲酸的,会让你的滴定值偏大。
5楼2014-01-05 20:17:26
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softcheese

新虫 (初入文坛)

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5楼: Originally posted by taipin345 at 2014-01-05 20:17:26
嗯,很多文献不是说了要用中性甲醛啊,是用的酚酞指示剂调的,我是直接用pH计调到8.2的,至于为什么要调到这里,是因为甲醛氧化了会有甲酸的,会让你的滴定值偏大。

那你用的甲醛是每加一个样品调10ml还是一批一起调?我发现甲醛调完PH特别不稳定,几分钟ph就变化了,呵呵 对了 还问一下,你使用甲醛有什么防护措施吗?是在通风橱里面还是带了防毒面具或者眼睛什么的吗?感觉甲醛很刺激眼睛,请教亲一下
6楼2014-01-06 09:52:30
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taipin345

铜虫 (小有名气)

嗯,我一般是一次性调很多甲醛用,我后来就没有测过了,防护的话就是带一个口罩吧,感觉效果不是很好,有条件的话还是在通风厨吧,这东西挺刺激的,感觉不好,你用的甲醛公式是什么啊??交流一下哈~
7楼2014-01-06 11:50:49
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softcheese

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by taipin345 at 2014-01-06 11:50:49
嗯,我一般是一次性调很多甲醛用,我后来就没有测过了,防护的话就是带一个口罩吧,感觉效果不是很好,有条件的话还是在通风厨吧,这东西挺刺激的,感觉不好,你用的甲醛公式是什么啊??交流一下哈~

呵呵  我用的是(M*(V1-V2)*1000)/(6.38*N*V*htot)  最后在成个100%  V1样品消耗碱,V2是未水解样品消耗碱,V是取的水解物的体积,你也是用胰蛋白酶水解吗?我测加入不容量的酶水解度差别不大 而且都非常低 愁人 你做的怎么样?
8楼2014-01-07 16:04:19
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taipin345

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by softcheese at 2014-01-07 16:04:19
呵呵  我用的是(M*(V1-V2)*1000)/(6.38*N*V*htot)  最后在成个100%  V1样品消耗碱,V2是未水解样品消耗碱,V是取的水解物的体积,你也是用胰蛋白酶水解吗?我测加入不容量的酶水解度差别不大 而且都非常低 愁 ...

嗯,怎么说呢,胰蛋白酶毕竟是专一性很强的酶,只水解赖氨酸和精氨酸,所以一般水解度都很低的,我的差别也不大,一般也就是在10左右徘徊,呵呵~~你把别的条件换换试试,比如温度什么的
9楼2014-01-07 17:52:50
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taipin345

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by softcheese at 2014-01-07 16:04:19
呵呵  我用的是(M*(V1-V2)*1000)/(6.38*N*V*htot)  最后在成个100%  V1样品消耗碱,V2是未水解样品消耗碱,V是取的水解物的体积,你也是用胰蛋白酶水解吗?我测加入不容量的酶水解度差别不大 而且都非常低 愁 ...

你能再解释一下你公式里面的字母的含义不?还有采用的单位。,,我怎么用你的这个公式算的水解度好大啊0 0
10楼2014-01-07 17:57:41
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