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lslsp212

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白酶水解的相关问题? 已有2人参与

各位虫友们。请问我用碱性蛋白酶酶解蛋白之后,将酶解液进行二次酶解(风味蛋白酶),为什么在进行第二次酶解的时候水解度增加很少呢?不是风味蛋白酶具有外切酶活性么?按照甲醛滴定发测定水解度的原理,此时水解度应该增加很多才对啊?  求解。。。。谢谢
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fm707755

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、风味酶中外切酶的活力是多少?风味酶(按外切酶计)用量是多少?风味酶用量少的话可能达不到水解效果
2、水解pH、温度如果超出了风味酶的适宜的范围,也可能达不到水解效果
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7824303
2楼2014-09-13 19:16:42
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lslsp212

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fm707755 at 2014-09-13 19:16:42
1、风味酶中外切酶的活力是多少?风味酶(按外切酶计)用量是多少?风味酶用量少的话可能达不到水解效果
2、水解pH、温度如果超出了风味酶的适宜的范围,也可能达不到水解效果
http://muchong.com/bbs/viewthread.p ...

我测定的风味蛋白酶活力是90786.5U/g  蛋白酶用量大约3% ph7 温度为45℃  水解 2h
3楼2014-09-13 20:27:33
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fm707755

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by lslsp212 at 2014-09-13 20:27:33
我测定的风味蛋白酶活力是90786.5U/g  蛋白酶用量大约3% ph7 温度为45℃  水解 2h...

这个酶用量还是挺大的了。用的条件也是风味酶是使用范围。
蛋白酶活如果是用酪蛋白为底物测的,那就是测的是内切酶的活力,外切酶是测的氨肽酶或羧肽酶活力。
有没有试过单用风味酶?如果这个风味酶是按中性酶的方法测的,里面的外切酶应该也是不低了。

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4楼2014-09-13 21:31:02
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jia104559257

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

温度提高到50℃试试,最近在做酶解实验,我用的风味酶最适温度在50℃,酶解时间可以稍微加长,加酶量6000U/g,水解两小时水解度一般在20%左右

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做好自己
5楼2014-09-16 16:33:36
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lslsp212

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by jia104559257 at 2014-09-16 16:33:36
温度提高到50℃试试,最近在做酶解实验,我用的风味酶最适温度在50℃,酶解时间可以稍微加长,加酶量6000U/g,水解两小时水解度一般在20%左右

请问您是直接用风味蛋白酶进行酶解底物?还是讲风味蛋白酶作为二次酶解用酶?还有就是利用风味蛋白酶酶解时酶解液的pH变化明显不?
6楼2014-09-17 09:56:24
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lslsp212

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by fm707755 at 2014-09-13 21:31:02
这个酶用量还是挺大的了。用的条件也是风味酶是使用范围。
蛋白酶活如果是用酪蛋白为底物测的,那就是测的是内切酶的活力,外切酶是测的氨肽酶或羧肽酶活力。
有没有试过单用风味酶?如果这个风味酶是按中性酶的 ...

谢谢
7楼2014-09-17 09:56:39
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沉默的神yyq

新虫 (初入文坛)

楼主甲醛滴定的具体计算过程可否说一下啊,谢过
8楼2016-06-27 17:43:31
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Undoyou

新虫 (小有名气)

楼主,水解度是怎么样测量的呢?

发自小木虫Android客户端
9楼2019-04-25 23:24:29
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