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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于蛋白酶水解酪蛋白判断蛋白酶活性的问题
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fangfang0044

木虫 (小有名气)

[求助] 关于蛋白酶水解酪蛋白判断蛋白酶活性的问题 已有1人参与

麻烦问一下大家有谁做过蛋白酶裂解酪蛋白从而判断蛋白酶活性的实验，弱问如何用标准物质酪氨酸建立标准曲线？？？看了外文文献没有详细的步骤，不是很明白，实在不知道如何下手，请高手指点。。。谢谢
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努力，为了明天！
1楼 2012-10-23 08:32:01
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氢化大雪

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

什么意思啊？》没看清楚楼主说的什么
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美酒香茗
2楼2012-10-28 18:52:49
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fangfang0044

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 氢化大雪 at 2012-10-28 18:52:49
什么意思啊？》没看清楚楼主说的什么

如何通过胰蛋白酶裂解酪蛋白来判断胰蛋白酶的活性？
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努力，为了明天！
3楼2012-10-30 21:00:34
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氢化大雪

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
fangfang0044: 金币+5, ★有帮助, 这个方法可以考虑作为测定游离胰蛋白酶活性的方法，我的存在材料的干扰，如果用这种方法的话存在扩散不好的问题，不过还是非常感谢你的回答。 2012-11-01 09:15:52
哦，可以把酪蛋白添加到营养琼脂里面做成平板，打孔后将胰蛋白酶液点到平板上的孔中，37℃保温几个小时后就可以看到溶解圈了，溶解圈越大则没的活性越强
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美酒香茗
4楼2012-10-31 12:27:52
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梓魅

铜虫 (正式写手)
必须得是酶解酪蛋白吗？我知道胰蛋白酶是有好多底物的，譬如BAEE，BAPNA，都可以用来测胰蛋白酶活力
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5楼2012-10-31 16:28:44
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fangfang0044

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 梓魅 at 2012-10-31 16:28:44
必须得是酶解酪蛋白吗？我知道胰蛋白酶是有好多底物的，譬如BAEE，BAPNA，都可以用来测胰蛋白酶活力

主要是我的材料对胰蛋白酶酶解那两种底物生成的新物质有吸附作用，吸附后就测不到信号了，无法计算酶的活性。
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努力，为了明天！
6楼2012-11-01 09:09:04
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superior111

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

测定的方法取决于你用的蛋白酶制剂的pH，例如可以用福林试剂法，你可有按照蛋白酶制剂的国标来测。。。
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Mol是分子生物学molecularbiology前三个字母，EPI=EmuchProfessionalIndex，即小木虫专家指数，MolEPI也就是小木虫分子生物版专家指数。
7楼2014-05-24 11:44:10
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梁以薰

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by superior111 at 2014-05-24 11:44:10
测定的方法取决于你用的蛋白酶制剂的pH，例如可以用福林试剂法，你可有按照蛋白酶制剂的国标来测。。。

不用福林酚法可以么？直接用紫外测吸光度？
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如人饮水，冷暖自知
8楼2014-12-19 09:51:21
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superior111

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 梁以薰 at 2014-12-19 09:51:21
不用福林酚法可以么？直接用紫外测吸光度？...

干嘛不用福林酚法，又不麻烦

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Mol是分子生物学molecularbiology前三个字母，EPI=EmuchProfessionalIndex，即小木虫专家指数，MolEPI也就是小木虫分子生物版专家指数。
9楼2014-12-20 08:38:43
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梁以薰

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by superior111 at 2014-12-20 08:38:43
干嘛不用福林酚法，又不麻烦
...

直接用紫外不可以么？
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如人饮水，冷暖自知
10楼2014-12-20 14:32:12
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