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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 蛋白酶水解的相关问题？
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lslsp212

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白酶水解的相关问题？ 已有2人参与

各位虫友们。请问我用碱性蛋白酶酶解蛋白之后，将酶解液进行二次酶解（风味蛋白酶），为什么在进行第二次酶解的时候水解度增加很少呢？不是风味蛋白酶具有外切酶活性么？按照甲醛滴定发测定水解度的原理，此时水解度应该增加很多才对啊？  求解。。。。谢谢
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1楼 2014-09-13 10:27:23
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lslsp212

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by jia104559257 at 2014-09-16 16:33:36
温度提高到50℃试试，最近在做酶解实验，我用的风味酶最适温度在50℃，酶解时间可以稍微加长，加酶量6000U/g,水解两小时水解度一般在20%左右

请问您是直接用风味蛋白酶进行酶解底物？还是讲风味蛋白酶作为二次酶解用酶？还有就是利用风味蛋白酶酶解时酶解液的pH变化明显不？
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6楼2014-09-17 09:56:24
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fm707755

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、风味酶中外切酶的活力是多少？风味酶（按外切酶计）用量是多少？风味酶用量少的话可能达不到水解效果
2、水解pH、温度如果超出了风味酶的适宜的范围，也可能达不到水解效果
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7824303
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2楼2014-09-13 19:16:42
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lslsp212

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fm707755 at 2014-09-13 19:16:42
1、风味酶中外切酶的活力是多少？风味酶（按外切酶计）用量是多少？风味酶用量少的话可能达不到水解效果
2、水解pH、温度如果超出了风味酶的适宜的范围，也可能达不到水解效果
http://muchong.com/bbs/viewthread.p ...

我测定的风味蛋白酶活力是90786.5U/g  蛋白酶用量大约3% ph7 温度为45℃  水解 2h
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3楼2014-09-13 20:27:33
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fm707755

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by lslsp212 at 2014-09-13 20:27:33
我测定的风味蛋白酶活力是90786.5U/g  蛋白酶用量大约3% ph7 温度为45℃  水解 2h...

这个酶用量还是挺大的了。用的条件也是风味酶是使用范围。
蛋白酶活如果是用酪蛋白为底物测的，那就是测的是内切酶的活力，外切酶是测的氨肽酶或羧肽酶活力。
有没有试过单用风味酶？如果这个风味酶是按中性酶的方法测的，里面的外切酶应该也是不低了。
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lslsp212
4楼2014-09-13 21:31:02
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