24小时热门版块排行榜    

查看: 7819  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

SDAUWY

新虫 (初入文坛)

[求助] 分子新手,PCR产物回收浓度太低,请教各位虫友! 已有6人参与

本人刚开始接触分子方面的试验,准备做RNA干扰,目前正用带T7的引物跑PCR,产物带挺亮,然后用天根的试剂盒切胶回收的浓度太低,一般都在30ng/μl左右。我后续要用这个回收产物做模板走promega T7BiboMAX Express RNAi System 这个试剂盒的程序,要求模板量在1 μg,但我的回收产物远不够这个量,请教各位虫友怎么提高回收产物的量,或者有做过这个的我想请教下整个过程,非常感谢!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生物知识 蛋白表达纯化鉴定精华

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

saiman131415

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
SDAUWY(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-19 20:41:39
试剂盒回收一般是不会出问题的,你的PCR产物长度要么短了,要么长了,胶水浴溶解后加1倍预冷异丙醇和5ul 3M 醋酸钠,冰浴后再过柱子
走别人的路让别人无路可走
7楼2015-06-19 14:52:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

博克侬浮码

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
SDAUWY(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-19 20:41:09
多扩几管PCR,在回收过柱子的时候把离心后的液体再过一遍柱子,洗脱时也是,洗脱两次,加的洗脱液量不要太大,我这样做回收的时候浓度在100-300ng/ul左右
2楼2015-06-18 10:36:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doudou_32

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
SDAUWY(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-19 20:41:17
如果你跑出来的带是单一一条带,可以试试PCR产物回收试剂盒,回收效率会高一些。
3楼2015-06-18 11:03:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

SDAUWY

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 博克侬浮码 at 2015-06-18 10:36:19
多扩几管PCR,在回收过柱子的时候把离心后的液体再过一遍柱子,洗脱时也是,洗脱两次,加的洗脱液量不要太大,我这样做回收的时候浓度在100-300ng/ul左右

谢谢,我再试试,今天刚跑的PCR产物有500-600的浓度,按你的说法做做试试看能回收到多少
4楼2015-06-18 15:54:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +6 慕寒mio 2026-03-16 6/300 2026-03-18 14:26 by 007_lilei
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[考研] 299求调剂 +5 △小透明* 2026-03-17 5/250 2026-03-18 11:49 by 尽舜尧1
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 5/250 2026-03-18 11:13 by QGZDSYS
[考研] 0703化学求调剂 总分331 +3 ZY-05 2026-03-13 3/150 2026-03-18 10:58 by macy2011
[考研] 环境工程调剂 +8 大可digkids 2026-03-16 8/400 2026-03-18 09:36 by zhukairuo
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 10/500 2026-03-17 15:07 by 一鸭鸭哟
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +5 d如愿上岸 2026-03-12 8/400 2026-03-16 15:19 by peike
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油!? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 321求调剂(食品/专硕) +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
信息提示
请填处理意见