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yanjifa1989

银虫 (小有名气)

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专业: 肿瘤化学药物治疗

[求助] 做普通的实时定量PCR需要那些试剂？跪求懂行的虫友指教已有2人参与

之前一点都没有接触过PCR的东东，现在老板要我们做PCR，上来就让我们自己去联系生产PCR的厂家，让我们问好做实验用的试剂都是神马价格，我勒个去，真心懵了，真心不知道该买那些试剂，就是做普通的实时定量PCR实验。跪求虫友们指教一二。做普通的实时定量PCR，都需要那些试剂？在哪里能买到？本人在石家庄。

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海底的贝壳

1楼 2014-06-24 11:06:39

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记忆的雨

新虫 (初入文坛)

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专业: 分子与进化生态学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yanjifa1989(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-06-24 14:22:03
yanjifa1989: 金币+1, ★★★很有帮助, 非常感谢 2014-06-24 15:36:43

买试剂我们实验室用的多半跟天根这个厂家买，做CPR首先提DNA可以用CTAB法，查查相关的试剂；还可以直接联系厂家买提DNA的试剂盒，比较方便。PCR需要用到Taq酶，限制性内切酶切断DNA，加引物用T4连接酶将引物与酶切片段连接（可以找已有研究所用的引物来筛选，引物也在厂家定制，这一步是将你需要的片段选出来），实验整个过程还需要去离子水，dNTP在taq酶中会有。记住所有的试剂在-20度可长期保存，试剂除酶外要分装，不要反复冻融。至于你们那边有哪些厂家，你可以去问问做分子的实验室给个联系电话。我们提植物DNA的试剂盒提一个DNA的成本是6元，其他试剂你网上查一下吧，规格不一样价格也不一样