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yanjifa1989

银虫 (小有名气)

[求助] 做普通的实时定量PCR需要那些试剂?跪求懂行的虫友指教 已有2人参与

之前一点都没有接触过PCR的东东,现在老板要我们做PCR,上来就让我们自己去联系生产PCR的厂家,让我们问好做实验用的试剂都是神马价格,我勒个去,真心懵了,真心不知道该买那些试剂,就是做普通的实时定量PCR实验。跪求虫友们指教一二。做普通的实时定量PCR,都需要那些试剂?在哪里能买到?本人在石家庄。
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海底的贝壳
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记忆的雨

新虫 (初入文坛)

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★ ★ ★ ★
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yanjifa1989(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-06-24 14:22:03
yanjifa1989: 金币+1, ★★★很有帮助, 非常感谢 2014-06-24 15:36:43
买试剂我们实验室用的多半跟天根这个厂家买,做CPR首先提DNA可以用CTAB法,查查相关的试剂;还可以直接联系厂家买提DNA的试剂盒,比较方便。PCR需要用到Taq酶,限制性内切酶切断DNA,加引物用T4连接酶将引物与酶切片段连接(可以找已有研究所用的引物来筛选,引物也在厂家定制,这一步是将你需要的片段选出来),实验整个过程还需要去离子水,dNTP在taq酶中会有。记住所有的试剂在-20度可长期保存,试剂除酶外要分装,不要反复冻融。至于你们那边有哪些厂家,你可以去问问做分子的实验室给个联系电话。我们提植物DNA的试剂盒提一个DNA的成本是6元,其他试剂你网上查一下吧,规格不一样价格也不一样
2楼2014-06-24 11:24:55
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jjheng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
yanjifa1989: 金币+1, ★★★很有帮助, 非常感谢 2014-06-24 15:34:06
实时定量PCR一般都是用的2*预混液,life和takala的都有,自己只需要准备模板和引物就可以了
3楼2014-06-24 14:43:13
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20140626wh

新虫 (初入文坛)

我们做普通的PCR一般买的试剂盒,例如公司宝生物工程(大连),天根,凯杰都有相关试剂盒卖
4楼2014-06-26 16:52:25
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