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linden00

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 蛋白上清表达无活性，求复性方法已有2人参与

我的蛋白在上清中有大量表达，但是做EMSA检测无活性，看文献中是降低盐酸胍浓度来复性的。有没有人做过柱上复性的？想知道具体方法。我是应该直接按包涵体的方法复性还是上清在镍柱纯化的同时复性呢？另外蛋白中有几个半胱氨酸，没有二硫键，是不是一定要加巯基乙醇来保护巯基？

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1楼 2015-05-26 11:01:46

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raycupid

金虫 (初入文坛)

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引用回帖:

4楼: Originally posted by linden00 at 2015-05-26 17:11:09
但是上清无活性呀...

有些特殊情况确实需要如此，如果真的确认上清表达的蛋白没活性，就变性后尝试复性试试，比如需要二聚体时，就往往要用复性才能得到。

发自小木虫Android客户端

13楼2017-02-26 11:26:47

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