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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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warkan

金虫 (正式写手)

[求助] 引物错配问题请教 已有3人参与

19bp的引物在中间和3‘端各一个错配能否扩增出目的条带,想要通过PCR鉴定“点突变”
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erland21411

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个要看你使用的酶和模板吧,比如用质粒做模板的时候应该就可以扩增出来,但是用cDNA做模板就不一定了。
3楼2015-05-25 12:25:30
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
点突变可以啊,只是对PCR扩增特异性要求较高,注意使用特异性高的试剂
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
2楼2015-05-25 09:47:11
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feng890327

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议楼主把引物设计长一点,引物越短越容易发生错配,产生特异性扩增,至少要在30bp以上吧
4楼2015-05-25 14:19:57
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